Question

5．下面是對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)，請回答有關(guān)問題．步驟如下：
A．制備稀釋倍數(shù)為10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶的系列稀釋液．
B．如下圖是采用純化酵母菌培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．

（1）對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定選用圖[A]稀釋涂布平板法接種樣品．
結(jié)果分析：
（2）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為10⁵的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為43.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL）4.34×10⁷．
（3）用這種方法測定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多，因?yàn)楫?dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落．

Answer 1

分析 1、平板劃線法是接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的造作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，在數(shù)次劃線之后培養(yǎng)，可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體-菌落；稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同梯度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)獲得由單細(xì)胞繁殖而來的菌落．
2、對微生物進(jìn)行分離、計(jì)數(shù)常用的接種方法是稀釋涂布平板法，估算每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)時，往往選取30～300的平板，取至少三個平板的平均值，每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)=（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)；由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時平板上觀察的是一個菌落，因此估算的菌落數(shù)少于實(shí)際菌落數(shù)．
3、微生物培養(yǎng)過程中要嚴(yán)格遵循無菌操作．

解答 解：（1）測量大腸桿菌數(shù)量常用的接種方法是稀釋涂布平板法，即圖中的A．
（2）每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是=（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)=（43.4÷0.1）×10⁵=34.34×10⁷個．
（3）由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時平板上觀察的是一個菌落，因此實(shí)際菌落數(shù)多于估算的菌落數(shù)．
故答案為：
（1）A  稀釋涂布平板法          
（2）4.34×10⁷
（3）多  當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落

點(diǎn)評 本題的知識點(diǎn)是微生物培養(yǎng)過程，分離微生物和統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)常用的常用方法，主要考查學(xué)生設(shè)計(jì)和完善實(shí)驗(yàn)步驟，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲取結(jié)論的能力和提出問題進(jìn)行進(jìn)一步探究的能力，利用所學(xué)的微生物知識解決生活問題的能力．