Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)，牛的瘤胃中含有多種纖維素分解菌，這些纖維素分解菌可用于分解秸稈等廢棄物。某興趣

小組按以下實(shí)驗(yàn)流程分離獲取了牛瘤胃中的纖維素分解菌。

①?gòu)耐涝讏?chǎng)獲取新鮮瘤胃液，短暫離心后過濾。

②將濾液接種到含有羧甲基纖維素鈉和染色劑A的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

③將從步驟②獲取的目標(biāo)菌落接種到以濾紙條為唯一碳源的培養(yǎng)基中，搖床懸浮培養(yǎng)5天，觀察濾紙的崩解效果。

④取崩解效果最好的幾片濾紙，將上面的菌種接種到同體培養(yǎng)基上，觀察菌落生長(zhǎng)情況。

請(qǐng)回答下列問題：

（1）步驟②中的培養(yǎng)基加入的染色劑A為___________，若此培養(yǎng)基中出現(xiàn)___________，則可以證明濾液中含有纖維素分解菌。

（2）從基質(zhì)狀態(tài)上劃分，步驟③所使用的培養(yǎng)基是_________，以濾紙條為唯一碳源的目的是_________，造成濾紙條崩解的原因是______________________。

（3）若步驟④的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是_________________，可得出牛瘤胃中有多種纖維素分解菌的結(jié)論。

（4）步驟④得到多種纖維素分解菌后，仍需要進(jìn)一步分離純化。其實(shí)驗(yàn)思路是_______。

Answer 1

【答案】剛果紅 以纖維素分解菌為中心的透明圈 液體培養(yǎng)基 增加纖維素分解菌的濃度 纖維素分解菌中含有纖維素酶，纖維素酶可將濾紙中的纖維素分解成葡萄糖 培養(yǎng)基中出現(xiàn)了多種不同特征（形狀、大小、顏色等）的菌落 分別挑取步驟④中不同特征的菌落，用平板劃線法（稀釋涂布平板法）分別接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到單菌落

【解析】

分離中纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程是：取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖供微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，該培養(yǎng)基上其他微生物則不能生長(zhǎng)。在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。挑取菌落，用平板劃線法或稀釋涂布平板法分別接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，進(jìn)一步分離純化得到單菌落。

（1）步驟②中的培養(yǎng)基加入的染色劑A為剛果紅，若此培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，則可以證明濾液中含有纖維素分解菌。

（2）步驟③中用到搖床懸浮培養(yǎng)，因此該培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，以濾紙條為唯一碳源的目的是增加纖維素分解菌的濃度，纖維素分解菌中含有纖維素酶，纖維素酶可將濾紙中的纖維素分解成葡萄糖，造成濾紙條崩解。

（3）若步驟④的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是培養(yǎng)基中出現(xiàn)了多種不同特征（形狀、大小、顏色等）的菌落，可得出牛瘤胃中有多種纖維素分解菌的結(jié)論。

（4）步驟④得到多種纖維素分解菌后，仍需要進(jìn)一步分離純化。實(shí)驗(yàn)思路是：分別挑取步驟④中不同特征的菌落，用平板劃線法（稀釋涂布平板法）分別接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到單菌落。