Question

【題目】回答下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的問題。

（1）植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都會用到超凈臺，實驗前必須打開超凈臺的__________和__________，前者可以排出工作室原來的空氣，將塵埃粒和生物顆粒帶走。

（2）利用MS培養(yǎng)基配置發(fā)芽培養(yǎng)基時，除了加相應(yīng)量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，還需要加入一定量的__________，以配置成固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配置后需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后備用，影響高壓蒸汽滅菌效果的因素有溫度、壓力、__________等因素。

（3）若使用自然生長的菊花莖段，進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，則可用__________和次氯酸鈉對莖段進(jìn)行消毒；若莖段取自經(jīng)__________培養(yǎng)的菊花幼苗，則不需要進(jìn)行消毒，可直接插入生芽培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)芽培養(yǎng)時__________（需要/不需要）光照條件。

Answer 1

【答案】過濾風(fēng) 紫外燈 瓊脂 時間 70%乙醇 無菌 需要

【解析】

植物組織培養(yǎng)的注意事項：（1）接種時應(yīng)注意的事項：接種室要消毒；無菌操作；接種時要防止交叉污染；接種完立刻蓋好瓶口。（2）外植體接種前，需要將接種室、接種箱滅菌和對外植體消毒的操作：接種前一天，將接種室的四個角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸；接種前1小時，在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來蘇水；桌椅也用來蘇水擦拭；接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。將滅菌室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌。接種前，操作者用肥皂清洗雙手，擦干，再用酒精棉球擦拭雙手。用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。

實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒。實驗室常用的滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

（1）超凈臺的工作原理是：在特定的空間內(nèi)，室內(nèi)空氣通過特殊裝置過濾吹出的潔凈過濾風(fēng)可以排出工作室原來的空氣，將塵埃顆粒和生物顆粒帶走，形成無菌的工作環(huán)境。在此操作過程中，同時需打開紫外燈，持續(xù)30分鐘以上。

（2）利用MS培養(yǎng)基配置成的發(fā)芽培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，因此除了加相應(yīng)量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外，還需要加一定量的凝固劑瓊脂，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后備用。高壓蒸汽滅菌一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。因此影響高壓蒸汽滅菌效果的因素有溫度、壓力、時間等因素。

（3）進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，需要對外植體進(jìn)行消毒處理，用70%乙醇和5%次氯酸鈉對莖段進(jìn)行消毒；若莖段取自經(jīng)無菌培養(yǎng)的菊花幼苗，則不需進(jìn)行消毒，可直接在無菌條件下插入生芽培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)芽培養(yǎng)時需要在光照條件下培養(yǎng)，以利于葉綠素的合成。