Question

【題目】目前流感疫苗主要的生產(chǎn)介質(zhì)是雞胚。研究者用犬腎細(xì)胞（MDCK 細(xì)胞）培養(yǎng)流感病毒，制備疫苗并測定了其免疫效果。

（1）利用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基中需加入水、葡萄糖、_____、維生素、無 機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。為防止污染，需對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行_________處理，以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。

（2）將貼壁生長型 MDCK 細(xì)胞進(jìn)行馴化，可使之適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。與貼壁培養(yǎng)相比，懸浮培養(yǎng)利于提高細(xì)胞密度，傳代培養(yǎng)時(shí)不需要用_____消化，操作更簡單。

（3）通過克隆化培養(yǎng)，獲得若干單克隆細(xì)胞株。需要從這些單克隆細(xì)胞株中篩選出高產(chǎn)流感病毒的細(xì)胞株，請寫出篩選的思路_____。

（4）用 MDCK 細(xì)胞培養(yǎng)甲型 H1N1 流感病毒，制成疫苗后對小鼠進(jìn)行免疫接種（第一次免疫兩周后進(jìn)行第二次免疫）。第二次免疫后兩周接種甲型 H1N1 流感病毒，測定免疫效果，結(jié)果如圖 1、圖 2。

① 由圖 1 可知，用兩種疫苗免疫小鼠，均可產(chǎn)生較高水平的抗體，說明兩種疫苗均可激發(fā)小鼠對流感病毒的_____免疫應(yīng)答。

② 由圖 2 可知，兩種疫苗都對小鼠有較好的_____作用。

Answer 1

【答案】氨基酸 滅菌 胰蛋白酶 在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該選擇培養(yǎng)基中，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有目的細(xì)胞可以存活 特異性（或體液） 免疫預(yù)防

【解析】

體液免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后，開始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。

（1）利用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基中需要加入水、葡萄糖、氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。為防止污染，需對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理，以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。
（2）將貼壁生長型MDCK細(xì)胞進(jìn)行馴化，可使之適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。與貼壁培養(yǎng)相比，懸浮培養(yǎng)利于提高細(xì)胞密度，傳代培養(yǎng)時(shí)不需要用胰蛋白酶消化，操作更簡單。
（3）從這些單克隆細(xì)胞株中篩選出高產(chǎn)流感病毒的細(xì)胞株，篩選思路為：在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該選擇培養(yǎng)基中，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有目的細(xì)胞可以存活。
（4）①由圖1可知，用兩種疫苗免疫小鼠，均可產(chǎn)生較高水平的抗體，說明兩種疫苗均可激發(fā)小鼠對流感病毒的特異性免疫應(yīng)答。
② 由圖 2 可知，兩種疫苗作用下小鼠的存活率都高于對照組，說明兩種疫苗都對小鼠有較好的免疫預(yù)防作用。