Question

微生物與人類關(guān)系密切，回答有關(guān)微生物及其應(yīng)用的問題：
（1）柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油（如圖1）．

①選擇產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物的生長提供了

 

．
②微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測

 

來確定其應(yīng)用價(jià)值．為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用

 

技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用．
（2）苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物．研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖2所示，①為土壤樣品．

①圖2中④為對照，微生物在④中不生長、在⑤中生長．④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于

 

；使用

 

法可以在⑥上獲得單個(gè)菌落．
②采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么要倒置培養(yǎng)？

 

．
（3）急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌、病毒通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的，因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施．
①檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用“涂布器”分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量．用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對照組？

 

．為什么？

 

．
②分別取0.1mL已稀釋了10³倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為

 

個(gè)．
③已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸、產(chǎn)氣．現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞的試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)和功能,細(xì)胞器中其他器官的主要功能,微生物的利用

專題：

分析：閱讀題干可知本題是生物技術(shù)與實(shí)踐的知識，知識范圍較寬，然后根據(jù)問題涉及的具體內(nèi)容回憶相關(guān)知識點(diǎn)，結(jié)合問題要求進(jìn)行回答．

解答： 解：（1）①植物油中不含有礦質(zhì)元素，植物油由C、H、O三種元素構(gòu)成，微生物通常以此作為碳源．
②要確定脂肪酶的應(yīng)用價(jià)值，應(yīng)檢測脂肪酶的活性；由于固定化酶能使能夠重復(fù)使用，因而可降低生物柴油生產(chǎn)成本．
（2）①若④是對照組，⑤是實(shí)驗(yàn)組，由于⑤中培養(yǎng)基中苯酚為唯一碳源，微生物在⑤中生長，④培養(yǎng)基中沒有加入苯酚做碳源，在④中不生長；分離菌種獲得單菌落常用的接種方法是稀釋涂布平板法或平板劃線法；采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基冷卻后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上會(huì)污染培養(yǎng)基，所以要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)．
（3）①為了準(zhǔn)確計(jì)數(shù)需設(shè)置對照組，以便確定培養(yǎng)基是否被雜菌污染，若被污染，則計(jì)數(shù)結(jié)果明顯比實(shí)際多．
②三個(gè)菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷0.1×10³=5.6×10⁵個(gè)，所以每升原水樣中的菌株數(shù)=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸個(gè)．
③由于大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，所以若觀察到有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌．
故答案為：
（1）①碳源     ②酶活性   酶的固定化
（2）①、④的培養(yǎng)基中沒有加入苯酚作為碳源，⑤的培養(yǎng)基中加入苯酚作為碳源     平板劃線法（或稀釋涂布平板）
②防止冷卻過程中凝結(jié)形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基
（3）①需要設(shè)置    因?yàn)樾枰�判定培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）
②5.6×10⁸個(gè)
③通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣，再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養(yǎng)24h．若試管內(nèi)有氣泡生成的說明水樣中有大腸桿菌

點(diǎn)評：微生物的應(yīng)用的題目是一類綜合性較強(qiáng)的題目，涉及的知識點(diǎn)比較多，包括微生物的培養(yǎng)和成分的提取，在復(fù)習(xí)的過程中注意微生物的無菌操作和微生物的分離與培養(yǎng)．