Question

2．某些細菌可分解有機磷農藥水胺硫磷，水胺硫磷的噴灑使土壤受到污染．某同學欲從受農藥污染的土壤中篩選出高效降解有機磷農藥的菌株．請回答下列問題：
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以水胺硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基上．從用途上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）若要測定稀釋液中的菌體數可在顯微鏡下用血球計數板直接計數．若要測定其活菌數量，可選用稀釋涂布平板法進行計數，使用該計數方法時研究人員分布在6個培養(yǎng)基平板上接種稀釋倍數為10⁴的稀釋液各0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出菌落數分別為19、130、166、400、188、116，則每克樣品中的活菌數為1.5×10⁷個．
（3）為了篩選出高效菌落，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌落的降解能力強．
（4）下列是關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述，其中錯誤的是D
A．要準確檢測總菌數可采用顯微鏡直接計數法
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0．lmL，分別涂布于各組平板上
C．運用顯微鏡直接計數法進行計數時也要進行適當的稀釋
D．確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、稀釋涂布平板法分離微生物時，應選擇30-300的菌落數進行計數．
3、兩種純化細菌的方法的比較

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計數，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

解答 解：（1）根據題意可知，“欲從受農藥污染的土壤中篩選出高效降解有機磷（水胺硫磷）農藥的菌株”，因此在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以水胺硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基上．從用途上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）若要測定稀釋液中的菌體數可在顯微鏡下用血球計數板直接計數．若要測定其活菌數量，可選用稀釋涂布平板法進行計數．應選擇30-300的菌落數進行計數，每克樣品中的活菌數=（130+166+188+116）÷4÷0.1×10⁴=1.5×10⁷個．
（3）為了篩選出高效菌落，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌落的降解能力強．
（4）A．要準確檢測總菌數可采用顯微鏡直接計數法，A正確；
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0．lmL，分別涂布于各組平板上，B正確；
C．如果菌液濃度過高時，運用顯微鏡直接計數法進行計數時也要進行適當的稀釋，C正確；
D．確定對照組無菌后，選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數，D錯誤．
故答案為：
（1）水胺硫磷   選擇
（2）血球計數板    稀釋涂布平板  1.5×10⁷
（3）強
（4）D

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生掌握選擇培養(yǎng)基的特點，識記分離和純化微生物常用的兩種方法，掌握采用稀釋涂布平板法計數微生物的具體過程，能結合所學的知識準確判斷各選項．