Question

20．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000mL．
（1）此培養(yǎng)基不能 （填“能”或“不能”）用于植物組織培養(yǎng)，理由是缺少植物激素．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是為目的菌提供氧氣．
（4）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，可采用稀釋涂布平板法或平板劃線法在含尿素的培養(yǎng)基上接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．初步篩選出來的菌種還需要用生化的方法作進一步的鑒定：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，則可準確說明該菌種能夠分解尿素．
（5）在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是①，需要消毒的是②③ （填序號）．
①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿�、诓０�、試管、錐形瓶和吸管�、蹖嶒灢僮髡叩碾p手
（6）在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落．A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有①②③ （填序號）．
①土樣不同　②培養(yǎng)基污染�、鄄僮魇д`�、軟]有設(shè)置對照
（7）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長．
滅菌的定義，用物理或化學方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達到無菌．         
消毒的定義，用物理或化學方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達到無害化．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基的成分中沒有植物激素，因此不能用于植物組織培養(yǎng)．
（2）該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細菌（目的菌）．不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素，碳源來自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．
（4）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，常采用稀釋涂布平板法或平板劃線法的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．初步篩選出來的菌種還需要用生化的方法作進一步的鑒定：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，則可準確說明該菌種能夠分解尿素．
（5）在實驗中，①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌，③實驗操作者的雙手需要消毒．
（6）該同學與其他同學獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實驗過程中沒有進行無菌操作．
（7）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后，才能倒掉．
故答案為：
（1）不能  缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng)）
（2）篩選目的菌  選擇
（3）尿素  葡萄糖  為目的菌提供氧氣
（4）稀釋涂布平板法  平板劃線法   酚紅  紅
（5）①和②③
（6）①②③
（7）滅菌

點評 本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識，考生要明確選擇培養(yǎng)基的選擇作用；識記培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分，識記植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的成分；識記常用的接種方法和具體操作過程；特別注意滅菌和消毒的對象和區(qū)別．