Question

9．圖為利用雞血細胞進行DNA粗提取和鑒定實驗的部分操作示意圖，請分析回答：

（1）上述圖示中，該實驗的正確操作順序是③一②一⑤一①一④（用序號與箭頭表示）．
（2）在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是利用溶解度不同，把DNA和蛋白質等雜質進行分離．
（3）步驟①的目的是析出并獲得DNA，其依據原理是DNA不溶于酒精，提高酒精使用效果的措施是充分預冷后再使用．
（4）DNA可用二苯胺試劑鑒定，沸水浴后的顏色反應為．
（5）實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA，利用植物組織提取DNA時，須先破碎細胞，破碎細胞時需添加食鹽和洗滌劑 進行研磨，添加該物質的目的是瓦解細胞膜，而加入食鹽的目的是溶解并提取DNA．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實驗材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液：
動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實驗材料是植物細胞，需要先用洗滌劑溶解細胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質，不分解DNA；
方案三的原理是蛋白質和DNA的變性溫度不同．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會出現白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍．

解答 解：（1）由以上分析可知，圖中表示正確的實驗操作順序是③→②→⑤→①→④．
（2）在提取過程中，利用在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，把DNA和蛋白質等雜質進行分離．
（3）步驟①中所用酒精最佳是經過充分預冷后再使用，該步驟的目的是利用DNA不溶于酒精的性質，可除去細胞中溶于酒精的物質而得到較純的DNA．
（4）DNA可用二苯胺試劑鑒定，沸水浴后的顏色反應為藍色．
（5）實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA，利用植物組織提取DNA時，須先破碎細胞，破碎細朐時需添加食鹽和洗滌劑 進行研磨，添加該物質的目的是瓦解細胞膜，而加入食鹽的目的是溶解并提取DNA．
故答案為：
（1）③一②一⑤一①一④
（2）利用溶解度不同，把DNA和蛋白質等雜質進行分離
（3）析出并獲得DNA DNA不溶于酒精 充分預冷后再使用
（4）二苯胺 藍色
（5）洗滌劑 瓦解細胞膜   溶解并提取DNA

點評 本題結合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實驗中采用的試劑及試劑的作用等，再結合所學的知識準確答題．