Question

花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，用一定劑量的紫外線處理黒芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如圖1．

據(jù)圖回答下列問題：
（1）過程②后，在顯微鏡下直接觀察融合的活細胞中有供體的

 

存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（2）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是

 

．原生質(zhì)體經(jīng)過

 

再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（3）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和

 

植株的根尖，通過

 

、

 

染色體和制片等過程制成裝片，然后再顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目．
（4）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．如圖2是用該引物對雙親及再生植株1-4進行PCR擴增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定是雜種植株的有

 

．
（5）該生物技術(shù)的意義是

 

．

Answer 1

考點：植物體細胞雜交的過程,觀察細胞的有絲分裂

專題：

分析：據(jù)圖分析，過程①表示原生質(zhì)體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，過程②PEG誘導原生質(zhì)體融合，體現(xiàn)了生物膜的結(jié)構(gòu)特點：一定的流動性．將雜種細胞培養(yǎng)成完整植株的過程是植物組織培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整植株．

解答： 解：（1）用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志．
（2）原生質(zhì)體沒有細胞壁的保護，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性；原生質(zhì)體通過細胞壁再生形成雜種細胞，進而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（3）分析再生植株染色體變異類型，需要將再生植株細胞染色體和黑芥苗與花椰菜細胞中的染色體制片觀察進行比較，制片的基本程序是解離、漂洗、染色、制片．
（4）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300 和600 的DNA 片段，黑芥還有堿基對為1000、1300 和1500 的片段，再生植株3，只含有長度為300 和600 的片段，與花椰菜一致，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA 片段，為雜種植株．
（5）植物體細胞雜交的意義是：克服遠緣雜交不親和障礙，大大擴展了雜交的親本組合范圍．
故答案為：
（1）葉綠體
（2）保持原生質(zhì)體完整性細胞壁
（3）雙親（或花椰菜和黑芥） 解離漂洗
（4）1、2、4 
（5）克服遠緣雜交不親和障礙

點評：本題綜合考查了植物細胞工程、細胞分裂裝片的制作觀察、PCR 圖譜的識別等相關(guān)內(nèi)容，同時也考查了考生識圖獲取信息的能力，具有一定難度．