Question

1．正當中國各界激烈爭論轉(zhuǎn)基因水稻安全問題之際，在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲．這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補充每天必需的維生素A．由于含有可以生成維生素A的β一胡蘿卜素．它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”．（摘自20l0年4月＜新世紀＞周刊）
“金色大米”的培育流程如圖所示．請回答下列問題．（已知酶I的識別序列和切點是一G↓ GATCC一．酶II的識別序列和切點是一↓ GATC-）．

（1）圖中a、b所示獲得目的基因的方法是反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄合成），請再寫出一種獲得目的基因的方法：從基因文庫中獲�。�
（2）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是基因表達載體的構(gòu)建．圖中c稱作基因表達載體，它的構(gòu)成除了復制原點、目的基因外，還必須有啟動子、終止子、標記基因等．
（3）據(jù)圖分析，在構(gòu)建c的過程中，目的基因用限制酶Ⅱ進行了切割．檢驗重組載體導入能否成功需要利用基因I作為標記基因．
（4）過程d可以采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示利用mRNA進行逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因，c表示基因表達載體的構(gòu)建，d表示目的基因?qū)�入受體細胞，e是水稻細胞進行植物的組織培養(yǎng)并篩選出符合要求的植株．

解答 解：（1）圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示逆轉(zhuǎn)錄，因此可以看出圖中a、b所示表示通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因．此外，還可以從基因文庫中獲取目的基因．
（2）基因工程操作四步曲中的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建．圖中c為基因表達載體，其組成包括復制原點、啟動子、目的基因、標記基因和終止子．
（3）據(jù)圖分析，目的基因的兩側(cè)有-GGATCC-、-GATC-兩種序列，由于酶I的識別序列和切點是一G↓GATCC一酶II的識別序列和切點是一↓GATC-，因此只能選擇限制酶Ⅱ獲取目的基因．圖中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此檢驗重組載體導入能否成功，需要利用基因I作為標記基因．
（4）將目的基因?qū)�入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄合成）    從基因文庫中獲取
（2）基因表達載體的構(gòu)建   基因表達載體     啟動子、終止子、標記基因 
（3）限制酶Ⅱ基因I
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

點評 本題具有一定的綜合性，難度適中，考查基因工程中目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、限制酶、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、蛋白質(zhì)工程等方面的知識，要求考生能識記基因工程技術(shù)的操作步驟，以及限制酶的作用特點，培養(yǎng)了考生識圖能力和審題能力．