Question

天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用．研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)人釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精．請回答下列問題：
（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是

 

，用

 

將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子

 

，以完成工程菌的構(gòu)建．
（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是

 

；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用

 

檢測．將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍

 

（選會或不會）出現(xiàn)透明圈，則證明培養(yǎng)成功．
（3）運送目的基因進入受體細胞的載體一般選用病毒或

 

，后者的形狀成

 

．
（4）由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受體細胞的頻率

 

，所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進行

 

操作．
（5）將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和氨基酸序列上是

 

（選相同或不同）的，這說明

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程操作的工具是限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體．
2、基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與表達．
3、目的基因的檢測有多種手段，如①DNA分子雜交技術(shù)；②分子雜交技術(shù)；③抗原-抗體雜交技術(shù)．
4、運載體通常用動植物病毒和質(zhì)粒，質(zhì)粒通常為小型環(huán)狀的DNA分子．
5、重組DNA分子受體細胞的機率比較小，對是否導(dǎo)入和表達還需要進行檢測．

解答： 解：（1）將目的基因（淀粉酶基因）切割下來所用的工具是限制酶，將淀粉酶基因和運載體連接起來需要DNA連接酶，之后將重組DNA分子導(dǎo)入受體細胞，以完成工程菌的構(gòu)建．
（2）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞，可采用DNA分子雜交技術(shù)；要鑒定目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交技術(shù)；因為該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍色，產(chǎn)生透明圈．所以也可以通過檢測淀粉酶活性來檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，即將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液檢驗，并檢驗工程菌菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈．
（3）運載體通常用動植物病毒和質(zhì)粒，質(zhì)粒通常為小型環(huán)狀的DNA分子．
（4）重組DNA分子受體細胞的機率比較小，對是否導(dǎo)入和表達還需要進行檢測．
（5）大腸桿菌是原核生物，只有核糖體，只能將氨基酸合成為多肽；而酵母菌是真核生物，含有多種細胞器，可合成一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，兩者中生產(chǎn)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列是相同的．；說明所有的生物共用一套密碼子．
故答案為：
（1）限制酶（限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶 導(dǎo)入受體細胞
（2）DNA分子雜交技術(shù)   抗原-抗體雜交或淀粉酶活性   會
（3）質(zhì)粒  小型環(huán)狀（雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀）  
（4）低  篩選 
（5）相同  所有的生物共用一套密碼子

點評：本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟，能應(yīng)用基因工程技術(shù)培育獲得的釀酒酵母工程菌，屬于考綱識記和理解層次的考查，這類試題需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中學(xué)會構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)．