Question

【題目】閱讀

單基因遺傳病的產(chǎn)前診斷可以做到無(wú)創(chuàng)嗎？

目前多數(shù)單基因遺傳病尚無(wú)有效的治療方法，致死、致崎和致殘率高，給家庭和社會(huì)造成了巨大負(fù)擔(dān)，因此避免此類患兒出生尤為重要。

傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷方法是通過(guò)絨毛膜取樣或羊膜腔穿刺獲得胎兒樣本后進(jìn)行產(chǎn)前診斷。該方法對(duì)于孕婦及胎兒是創(chuàng)傷性的，有流產(chǎn)、死胎等風(fēng)險(xiǎn)。妊娠婦女血漿中胎兒游離DNA(cffDNA)的發(fā)現(xiàn)使無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷成為可能。

基于cffDNA的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷(NIPD)某些單基因遺傳病已用于臨床，而且檢測(cè)病種越來(lái)越多。NIPD為高危妊娠夫婦提供了更安全的檢測(cè)方法，在一些國(guó)家已經(jīng)應(yīng)用NIPD方法診斷一些單基因遺傳病，而且不需要通過(guò)有創(chuàng)產(chǎn)前診斷進(jìn)行驗(yàn)證。

NIPD通過(guò)擴(kuò)增胎兒通用序列，如Y染色體序列以確定胎兒性別或RHD基因確定胎兒RH血型，來(lái)診斷單基因遺傳病，而不是直接檢測(cè)基因突變，比如僅在男胎中確診杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良，或僅在女胎中確診先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥，這樣避免了大約50%的有創(chuàng)產(chǎn)前診斷。早期一些NIPD是應(yīng)用PCR及限制性內(nèi)切酶切斷包含突變位點(diǎn)的DNA序列，再通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳判定結(jié)果檢測(cè)基因突變，如與軟骨發(fā)育不全相關(guān)的FGFR3基因突變，該方法準(zhǔn)確，快速，費(fèi)用相對(duì)低，但評(píng)價(jià)結(jié)果主觀性強(qiáng)，大約7%~8%無(wú)肯定結(jié)論，也不適用所有突變。

IPD技術(shù)用于臨床首先是針對(duì)父源性常染色體顯性遺傳病，即排除或識(shí)別父源性變異和檢測(cè)出新發(fā)變異。在這種情況下，技術(shù)方法簡(jiǎn)單直接，因?yàn)閷?dǎo)致突變的父源性基因并不存在于母體內(nèi)，通過(guò)檢測(cè)母體血漿中父源性等位基因的存在與否即可對(duì)胎兒進(jìn)行診斷。隱性遺傳病中父源性突變的缺失將提示胎兒為攜帶者或正常。利用PCR和限制性內(nèi)切酶分析在母體血漿中發(fā)現(xiàn)了一種父源性遺傳的引起囊性纖維化的突變。

母體血漿中細(xì)胞游離DNA來(lái)源于母親細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的凋亡。雖然胎兒游離DNA大約占5%-10%，且隨著孕周增加而增加，但其相對(duì)數(shù)量在孕期是高度變化的，影響因素包括孕周、胎盤大小、母親是否吸煙、母親體質(zhì)量指數(shù)和母親是否有先兆子癇等。考慮到這些不可預(yù)知的因素，NIPD測(cè)量時(shí)會(huì)觀察到假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。因此，取血后必須盡快分離血漿以維持胎兒DNA的最大比例。

利用母體血漿DNA無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷胎兒?jiǎn)位�因遺傳病是產(chǎn)前診斷的巨大進(jìn)步，診斷疾病的種類在逐漸增加，從最初只能鑒定是否遺傳父源性突變，到可以分析更為復(fù)雜的隱性遺傳病、X連鎖遺傳病和母源性顯性遺傳病，而且避免了有創(chuàng)產(chǎn)前診斷帶來(lái)的流產(chǎn)等風(fēng)險(xiǎn)，使得有家族史的夫婦可以獲得早期安全的產(chǎn)前診斷。但臨床應(yīng)用中NIPD仍面臨許多挑戰(zhàn)，對(duì)于復(fù)雜單基因遺傳病或罕見突變，試驗(yàn)過(guò)程繁瑣，費(fèi)用較高，其大規(guī)模用于臨床還有一段時(shí)間。隨著NIPD的發(fā)展，在今后的臨床實(shí)踐中，還需制定檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和指導(dǎo)方針，建立質(zhì)量保證體系和專業(yè)培訓(xùn)，以及商討可能出現(xiàn)的倫理問(wèn)題。

（1）單基因遺傳病如何定義？它的群體發(fā)病率和患者后代發(fā)病率如何？___________ 。

（2）產(chǎn)前診斷方法除了絨毛膜取樣或羊膜腔穿刺還有什么技術(shù)？__________ 。預(yù)防遺傳病的措施有哪些? _______。

（3）對(duì)于常染色體隱性遺傳病和X連鎖遺傳病，需要確定是否有母源性突變基因的遺傳。因?yàn)槟阁w血漿中DNA主要來(lái)源于母親(95%)， —般根據(jù)母體血漿中突變等位基因和野生型等位基因的比例來(lái)推斷確定胎兒基因型。請(qǐng)問(wèn)具體的判斷標(biāo)準(zhǔn)是什么？ ________ 。

（4）NIPD測(cè)量時(shí)一般出現(xiàn)假陰性結(jié)果的原因是什么？___________ 。

（5）用基因診斷來(lái)檢測(cè)遺傳病可能出現(xiàn)何種倫理問(wèn)題？ __________ 。

Answer 1

【答案】由單個(gè)或一對(duì)等位基因突變引起的疾病。群體發(fā)病率低，患者后代發(fā)病率較高 B超檢査、孕婦血細(xì)胞檢査、基因診斷 禁止近親結(jié)婚、早期避免致畸劑、提前終止妊娠、選擇生男孩或女孩 如果為純合子患兒，該比值會(huì)較高；如果胎兒和母親基因型相同，即為攜帶者，該比值相等；如果胎兒為野生型純合子，該比值降低。 由于母體血漿中cffDNA濃度低，極易發(fā)生假陰性。 患兒致病基因的檢測(cè)會(huì)使其因此受到社會(huì)的歧視

【解析】

遺傳病的監(jiān)測(cè)和預(yù)防
（1）產(chǎn)前診斷：胎兒出生前，醫(yī)生用專門的檢測(cè)手段確定胎兒是否患某種遺傳病或先天性疾病，產(chǎn)前診斷可以大大降低病兒的出生率。
（2）遺傳咨詢：在一定的程度上能夠有效的預(yù)防遺傳病的產(chǎn)生和發(fā)展。
（3）禁止近親婚配：降低隱性遺傳病的發(fā)病率。

（1）單基因遺傳病是指由單個(gè)或一對(duì)等位基因突變引起的疾病。群體中發(fā)病率較低，但在患者后代發(fā)病率較高。

（2）產(chǎn)前診斷方法有：B超檢査、孕婦血細(xì)胞檢査、基因診斷和絨毛膜取樣或羊膜腔穿刺等技術(shù)。目前采取的預(yù)防遺傳病的措施有：禁止近親結(jié)婚、早期避免致畸劑、提前終止妊娠、選擇生男孩或女孩。

（3）對(duì)于常染色體隱性遺傳病和X連鎖遺傳病，需要確定是否有母源性突變基因的遺傳。因?yàn)槟阁w血漿中DNA主要來(lái)源于母親(95%)， —般根據(jù)母體血漿中突變等位基因和野生型等位基因的比例來(lái)推斷確定胎兒基因型。如果為純合子患兒，該比值會(huì)較高；如果胎兒和母親基因型相同，即為攜帶者，該比值相等；如果胎兒為野生型純合子，該比值降低。（4）由于母體血漿中cffDNA濃度低，極易發(fā)生假陰性。

（5）用基因診斷來(lái)檢測(cè)遺傳病可能出現(xiàn)何種倫理問(wèn)題有：如對(duì)患兒致病基因的檢測(cè)會(huì)使其因此受到社會(huì)的歧視。