Question

【題目】臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。

回答下列問題：

（1）為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用___________法或__________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。

（2）為統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，取樣品適當(dāng)稀釋，用涂布法接種于培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后形成菌落，一般選擇菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

（3）為了檢驗(yàn)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，在該病菌菌落均勻生長(zhǎng)的平板的不同位置，分別放置含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片，培養(yǎng)一段時(shí)間后，在四個(gè)濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推斷，該病人目前適合使用的抗生素是______。含C的濾紙片周圍透明圈比含A的小，說明_____________；若抗生素B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，最可能的原因是該病人長(zhǎng)期服用抗生素B 導(dǎo)致的結(jié)果；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)一個(gè)菌落，這種菌落的出現(xiàn)可能是由于接種過程不嚴(yán)格導(dǎo)致的________，也可能是由于基因突變產(chǎn)生的抗生素D的耐藥菌，這種變異的特點(diǎn)是____________。

（4）培養(yǎng)基的滅菌方法是_________滅菌法，接種環(huán)的滅菌方法是________滅菌法。接種過程應(yīng)該在_____________進(jìn)行。

Answer 1

【答案】 平板劃線 稀釋涂布平板 30----300 A 該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱 雜菌污染 不定向性 高壓蒸汽 灼燒 點(diǎn)燃的酒精燈旁

【解析】試題分析：接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。根據(jù)材料分析，透明圈的出現(xiàn)，說明該菌不能生長(zhǎng)。常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌。

（1）分離菌落常用稀釋涂布平板法或劃線涂布法，接種于固體培養(yǎng)基的表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。

（2）取該單菌落適當(dāng)稀釋，使其“均勻生長(zhǎng)”的方法是用涂布法接種于固體培養(yǎng)基表面，適宜溫度培養(yǎng)，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（3）在抗藥性檢驗(yàn)過程中，如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強(qiáng)弱，由于四個(gè)濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，可以推斷出抗生素A對(duì)該致病菌的效果最好；含C的濾紙片周圍透明圈比含A的小，說明該致病菌對(duì)C的敏感性較A的弱；若抗生素B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，最可能的原因是該病人長(zhǎng)期服用抗生素B導(dǎo)致致病菌產(chǎn)生了抗藥性；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)一個(gè)菌落，這種菌落的出現(xiàn)可能是由于接種過程不嚴(yán)格導(dǎo)致的雜菌污染，也可能是由于基因突變產(chǎn)生的抗生素D的耐藥菌，基因突變的特點(diǎn)是不定向的。

（4）微生物培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，接種環(huán)的滅菌方法是灼燒滅菌，接種過程應(yīng)該在點(diǎn)燃的酒精燈旁進(jìn)行，以防止雜菌污染。