Question

植物細(xì)胞原生質(zhì)體的制備是植物體細(xì)胞雜交等技術(shù)的基礎(chǔ)．如圖表示利用機(jī)械法和酶解法制備原生質(zhì)體的簡要過程，請據(jù)圖回答：

（1）將植物葉的小圓片放在較高濃度的蔗糖溶液中，一段時間后，在細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜之間充滿了

 

，原因是

 

．
（2）機(jī)械法是指剪碎已經(jīng)發(fā)生質(zhì)壁分離的組織時，有些細(xì)胞只被剪去細(xì)胞壁，從而釋放出完整原生質(zhì)體的方法．使用這種方法，蔗糖溶液濃度對獲得原生質(zhì)體的數(shù)量和活性有很大影響，濃度過低會造成

 

 

不充分，易剪碎原生質(zhì)體；濃度過高，則會使

 

．
（3）用酶解法制備原生質(zhì)體的過程中，一般使用

 

酶處理葉片．與機(jī)械法相比，酶解法的優(yōu)點(diǎn)是

 

．
（4）16×25型的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室長和寬各為1mm，深度為0.1mm，有以雙線為界的中方格16個，每中方格又分成25個小方格．圖示一個中方格中原生質(zhì)體的分布情況，以該中方格為一個樣方，計(jì)數(shù)結(jié)果是原生質(zhì)體有

 

個．如果計(jì)數(shù)的中方格原生質(zhì)體平均數(shù)為18個，則1mL培養(yǎng)液中原生質(zhì)體的總數(shù)為

 

個．

Answer 1

考點(diǎn)：植物體細(xì)胞雜交的過程

專題：

分析：1、當(dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時，細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離，由于細(xì)胞壁具有全透性，在細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜之間充滿了外界溶液．
2、可以用纖維素酶和果膠酶去除植物的細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體．
3、利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目．

解答： 解：（1）將植物葉的小圓片放在較高濃度的蔗糖溶液中，一段時間后，在細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜之間充滿了蔗糖溶液，原因是細(xì)胞壁是全透性的．
（2）機(jī)械法是指剪碎已經(jīng)發(fā)生質(zhì)壁分離的組織時，有些細(xì)胞只被剪去細(xì)胞壁，從而釋放出完整原生質(zhì)體的方法．使用這種方法，蔗糖溶液濃度對獲得原生質(zhì)體的數(shù)量和活性有很大影響，濃度過低會造成質(zhì)壁分離不充分，易剪碎原生質(zhì)體；濃度過高，則會使原生質(zhì)體過快過多失水死亡．
（3）用酶解法制備原生質(zhì)體的過程中，一般使用纖維素酶和果膠酶處理葉片．與機(jī)械法相比，酶解法的優(yōu)點(diǎn)是不會傷害原生質(zhì)體，獲得的原生質(zhì)體數(shù)量多．
（4）酵母菌在計(jì)數(shù)時，計(jì)數(shù)原則為“計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右”，因此計(jì)數(shù)相鄰兩邊，計(jì)數(shù)結(jié)果是酵母菌有15個．如果計(jì)數(shù)的中方格酵母菌平均數(shù)為18個，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)=18÷25×400×10⁴=2.88×10⁶個．
故答案為：
（1）蔗糖溶液  細(xì)胞壁是全透性的
（2）質(zhì)壁分離  原生質(zhì)體過快過多失水死亡
（3）纖維素酶和果膠酶   不會傷害原生質(zhì)體，獲得的原生質(zhì)體數(shù)量多
（4）15    2.88×10⁶

點(diǎn)評：本題考查了植物細(xì)胞原生質(zhì)體的制備的方法和原理，考查的知識點(diǎn)是：質(zhì)壁分離、酶解法去除細(xì)胞壁、血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)方法，意在考查考生對于相關(guān)內(nèi)容的理解和識記能力，運(yùn)用能力．