Question

12．下列有關(guān)用雞血進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的操作，錯(cuò)誤的是（　�。�

• A． 雞血細(xì)胞中加入蒸餾水后，用玻棒攪拌
• B． 用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA
• C． 在溶有DNA的濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，用玻棒輕緩攪拌
• D． 將卷在玻棒上的絲狀物加入到4mL二苯胺試劑中，沸水浴加熱，冷卻后觀察

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色．
2、DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：A、雞血細(xì)胞中加入蒸餾水后，用玻棒攪拌，使細(xì)胞吸收脹破，A正確；
B、DNA在2mol/LNaCl溶液溶解度高，再結(jié)合酶的專一性原理，可用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA，B正確；
C、DNA不溶于體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，因此在溶有DNA的濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，用玻棒輕緩攪拌，這樣可以進(jìn)一步純化DNA，C正確；
D、將卷在玻棒上的絲狀物先溶于2mol/LNaCl溶液中，再向溶液中加入4mL二苯胺試劑，沸水浴加熱，冷卻后觀察，D錯(cuò)誤．
故選：D．

點(diǎn)評 本題考查DNA的粗提取和鑒定，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意．