基因工程基本操作流程如圖，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：
（1）圖中A是
 
．
（2）在上述基因工程的操作過(guò)程中，一定遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則的步驟有
 
．（填圖中序號(hào)）
（3）圖中的步驟
 
是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中
 
，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用．
（4）從分子水平分析，不同種生物之間的基因能成功拼接主要理論依據(jù)是
 
，能夠成功表達(dá)說(shuō)明了生物共用一套
 
．
（5）轉(zhuǎn)基因玉米獲得后，公眾在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面產(chǎn)生了爭(zhēng)議．食物方面公眾主要擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)產(chǎn)生
 
．
（6）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)植酸酶進(jìn)行改造，使其具有較好的高溫穩(wěn)定性時(shí)，首先必須了解植酸酶的
 
，然后改變植酸酶肽鏈的
 
序列，從而得到新的植酸酶．
考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)
專(zhuān)題：
分析：1、分析題圖：圖示是基因工程的基本操作流程，其中A為運(yùn)載體，①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定．
2、蛋白質(zhì)工程的過(guò)程：（1）根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）．（2）最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成．
3、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取 ②基因表達(dá)載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ④目的基因的檢測(cè)與鑒定．
4、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅．
解答： 解：（1）在基因工程中，目的基因與運(yùn)載體結(jié)合形成重組DNA，載體常用質(zhì)粒．
（2）堿基互補(bǔ)配對(duì)發(fā)生在DNA分子、RNA分子之間，①過(guò)程目的基因的DNA分子中有堿基互補(bǔ)配對(duì)，②過(guò)程目的基因DNA與質(zhì)粒的黏性末端配對(duì)，④過(guò)程中基因的表達(dá)有堿基互補(bǔ)配對(duì)，故基因工程中①②④有堿基互補(bǔ)配對(duì)．
（3）圖中的步驟②基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中
（4）不同生物的DNA分子結(jié)構(gòu)（雙螺旋結(jié)構(gòu)）和化學(xué)組成相同，因此不同種生物之間的基因能拼接成功；自然界所有生物共用一套遺傳密碼子，因此目的基因在不同的生物細(xì)胞中能正確表達(dá)．
（5）轉(zhuǎn)基因玉米獲得后，公眾在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面產(chǎn)生了爭(zhēng)議．食物方面公眾主要擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)產(chǎn)生毒性蛋白或過(guò)敏蛋白．
（6）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)其進(jìn)行改造時(shí)，首先必須了解植酸酶的空間結(jié)構(gòu)，然后改變植酸酶的氨基酸序列，從而得到新的植酸酶．
故答案為：
（1）運(yùn)載體   
（2）①②④
（3）②基因表達(dá)載體的構(gòu)建                     穩(wěn)定存在
（4）不同生物的DNA分子都為雙螺旋結(jié)構(gòu)          遺傳密碼
（5）毒性蛋白或過(guò)敏蛋白
（6）空間結(jié)構(gòu)          氨基酸
點(diǎn)評(píng)：本題難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的基本操作流程圖，綜合考查了基因工程、蛋白質(zhì)工程和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)．面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食．
練習(xí)冊(cè)系列答案
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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

下列屬于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、葉綠體基質(zhì)和線粒體基質(zhì)的共性的是（　�。�
①都含有DNA�、诙己械鞍踪|(zhì)　③都含有RNA�、芏寄墚a(chǎn)生ATP．
A、①②B、②③C、①④D、③④

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將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長(zhǎng)激素的基因后，重新置入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素．下列敘述正確的是（　�。�
A、把人生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌的過(guò)程需要限制酶、DNA聚合酶
B、生長(zhǎng)激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA連接酶
C、大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤與尿嘧啶含量相等
D、大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的變異類(lèi)型是可遺傳變異

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金茶花是中國(guó)特有的觀賞品種，但易得枯萎病，降低觀賞價(jià)值．科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，用轉(zhuǎn)基因方法培育出了抗枯萎病的新品種．請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）②是
 
，③是
 
，形成③所需要的工具酶有
 
．
（2）經(jīng)檢測(cè)，被③侵染的茶花葉片細(xì)胞具備了抗病性，這說(shuō)明②已經(jīng)
 
．欲快速培育大量該抗病新品種，應(yīng)該采用的技術(shù)是
 
，依據(jù)的理論基礎(chǔ)是
 
．
（3）通過(guò)轉(zhuǎn)基因方法獲得的抗病金茶花，將來(lái)產(chǎn)生的配子中是否一定含有抗病基因？
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

如圖是人們?cè)噲D利用基因工程的方法，用乙種生物（大腸細(xì)菌）生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質(zhì)．請(qǐng)根據(jù)下面的示意圖回答問(wèn)題：

（1）①操作過(guò)程需加入的物質(zhì)有
 
、
 
和ATP，④是目的基因的表達(dá)過(guò)程，此過(guò)程包括
 
．
（2）在此基因工程中，將目的基因?qū)氪竽c桿菌最可能的途徑是用
 
處理細(xì)胞，使細(xì)胞成為
 
細(xì)胞，然后將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與該細(xì)胞混合，在一定溫度下完成轉(zhuǎn)化．但實(shí)際上由于只有少數(shù)細(xì)胞能完成轉(zhuǎn)化，所以在基因工程的操作步驟中必須要有最后一個(gè)步驟
 
．
（3）基因工程的核心步驟是
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá)，產(chǎn)生的β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長(zhǎng)度變短．為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入棉花細(xì)胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過(guò)程如下．（啟動(dòng)子是基因的一個(gè)組成部分，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確的結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性．）請(qǐng)分析回答：
（1）①和②過(guò)程中所用的限制性?xún)?nèi)切酶分別是
 
、
 
．
（2）③過(guò)程中用酶切法可鑒定正、反義表達(dá)載體．用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正義基因表達(dá)載體獲得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四種長(zhǎng)度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達(dá)載體可獲得
 
種長(zhǎng)度的DNA片段，長(zhǎng)度分別是
 
．
（3）導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而抑制基因的表達(dá)，其意義是
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

某研究小組進(jìn)行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，如圖為他們前期研究工作的簡(jiǎn)要操作流程圖：

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是
 
；在步驟②之前擴(kuò)增H基因常采用的方法是
 
．
（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用的酶是
 
．
（3）構(gòu)建重組表達(dá)載體時(shí)，一般需要將H基因與載體結(jié)合，常用做基因工程載體的是
 
；在檢測(cè)受體細(xì)胞中是否已經(jīng)導(dǎo)入目的基因時(shí)，常常要借助載體上
 
的表達(dá)．
（4）某志愿者接種甲型H1N1流感疫苗后，第15天感染甲型H1N1流感病毒，則體內(nèi)
 
細(xì)胞將迅速增殖分化形成
 
細(xì)胞，從而產(chǎn)生大量抗體；當(dāng)該病毒侵入人體細(xì)胞后所引起的免疫反應(yīng)是
 
與宿主細(xì)胞緊密接觸并使其裂解．
（5）抗體的化學(xué)本質(zhì)是
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

基因分離定律的實(shí)質(zhì)是（　　）
A、子二代出現(xiàn)性狀分離
B、子二代性狀的分離比為3：1
C、測(cè)交后代形狀的分離比為1：1
D、等位基因隨著同源染色體的分開(kāi)而分離

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示．請(qǐng)回答以下基因工程技術(shù)操作中的問(wèn)題：

（1）構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)不光要有抗性基因、復(fù)制原點(diǎn)等，還應(yīng)該具備RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱(chēng)為
 
．
（2）獲取目的基因后可以用PCR技術(shù)擴(kuò)增．PCR儀器可以模擬DNA雙鏈在體內(nèi)的復(fù)制，所不同的是，PCR過(guò)程中的DNA聚合酶（taq酶）的
 
性比體內(nèi)的DNA聚合酶強(qiáng)；而在PCR過(guò)程中通過(guò)加熱（90-95℃）達(dá)到的結(jié)果，和體內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)所需
 
酶的作用相同．
（3）受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入目的基因的方法也不同．如受體細(xì)胞是植物細(xì)胞，可選用
 
轉(zhuǎn)化法；如受體細(xì)胞是細(xì)菌，則先用Ca2+處理，將其轉(zhuǎn)化為一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為
 
細(xì)胞．將人胰島素基因?qū)氪竽c桿菌內(nèi)且成功表達(dá)后，提取的產(chǎn)物還需進(jìn)行體外加工和改良，因?yàn)榇竽c桿菌缺乏
 
（細(xì)胞器），無(wú)法加工形成胰島素．
（4）pBR322分子中另有單個(gè)的BamHⅠ限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)限制酶BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理后得到的目的基因，通過(guò)DNA連接酶作用恢復(fù)
 
鍵，成功地獲得了重組質(zhì)粒，這說(shuō)明限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有
 
．
（5）為了檢測(cè)上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無(wú)ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落．再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果（空圈表示與圖二對(duì)照無(wú)菌落的位置）．與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是
 
，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是
 
質(zhì)粒．

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