Question

12．基因剔除是指用一定技術(shù)將待剔除的目的基因中插入一外源基因致使目的基因失活，再將其導(dǎo)入受體細(xì)胞并取代原有的正常基因，進(jìn)而獲得表型改變的基因剔除個(gè)體．近年來(lái)科研工作者通過(guò)基因剔除技術(shù)已經(jīng)獲得數(shù)百種基因定位缺陷小鼠．
（1）該項(xiàng)技術(shù)的原理是基因重組，最核心環(huán)節(jié)是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，待剔除的目的基因中插入的外源基因常起篩選作用，即標(biāo)記基因基因．
（2）獲得基因剔除小鼠時(shí)，常用ES細(xì)胞做受體細(xì)胞．ES細(xì)胞是由原始性腺或囊胚中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯，在功能上具有具有發(fā)育全能性．
（3）通過(guò)選擇培養(yǎng)獲得的重組ES細(xì)胞，其一對(duì)同源染色體上只有一條染色體上的等位基因被剔除，得到的小鼠是該基因缺失雜合體．若要獲得真正的基因剔除小鼠，需要將該基因缺失雜合體雌雄小鼠進(jìn)行雜交，從子代中選出隱性純合體，即為基因剔除小鼠．

Answer 1

分析 1、哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)．
2、具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造．
3、胚胎干細(xì)胞可用于治療人類的某些頑癥，如帕金森綜合癥．還可培育出人造器官，解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．

解答 解：（1）據(jù)題中信息可知，該項(xiàng)技術(shù)是基因工程，運(yùn)用的原理是基因重組，最核心環(huán)節(jié)是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．在靶基因中插入neo^R基因的目的是使靶基因失活和用于基因敲除細(xì)胞的篩選，是標(biāo)記基因．
（2）胚胎干細(xì)胞（ES）可由原始性腺或囊胚的分離培養(yǎng)獲得內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞．ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)的特點(diǎn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；ES細(xì)胞功能上具有發(fā)育全能性，有望在對(duì)人類ES細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化后用于疾病的細(xì)胞治療．
（3）若要獲得真正的基因剔除小鼠，需要將該基因缺失雜合體雌雄小鼠進(jìn)行雜交，從子代中選出隱性純合體，即為基因剔除小鼠．
故答案為：
（1）基因重組   基因表達(dá)載體的構(gòu)建   標(biāo)記基因
（2）原始性腺或囊胚    體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯     具有發(fā)育全能性
（3）該基因缺失雜合體雌雄小鼠    隱性純合體

點(diǎn)評(píng) 本題以基因治療的流程圖為載體，考查了基因工程、細(xì)胞工程以及胚胎工程等方面的知識(shí)，難度適中．考生要能夠識(shí)記細(xì)胞核移植的過(guò)程；識(shí)記囊胚包括內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層兩部分；明確基因工程中質(zhì)粒和目的基因需要利用同種限制酶進(jìn)行切割；掌握目的基因檢測(cè)和鑒定的一般方法等．