Question

20．如圖為利用農桿菌轉化法培育轉基因抗蟲棉的技術流程圖． 請據圖回答：

（1）圖中A為基因表達載體，在構建該結構時，Bt毒蛋自基因與Ti質粒結合的部位是T-DNA片段內．
（2）①過程是將基因表達載體轉移到農桿菌細胞內，經采用的方式是用鈣離子處理．
（3）通過植物個體水平上的抗蟲接種實驗，才能最終確定是否成功培育出了抗蟲棉植株．

Answer 1

分析 1、農桿菌轉化法的具體過程：
（1）利用土壤的Ti質粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農桿菌的Ti質粒上．
（2）將整合了目的基因的Ti質粒導入土壤農桿菌細胞內．
（3）利用土壤農桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒導入植物細胞內．
（4）含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因．
2、原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．

解答 解：（1）圖中A為基因表達載體；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，在構建基因表達載體時，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．
（2）①過程是將基因表達載體轉移到農桿菌細胞內；將目的基因導入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法，即是用鈣離子處理微生物細胞，使之處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（3）通過植物個體水平上的抗蟲接種實驗，才能最終確定是否成功培育出了抗蟲棉植株．
故答案為：
（1）基因表達載體      T-DNA片段內
（2）將基因表達載體轉移到農桿菌細胞內     用鈣離子處理
（3）植物個體水平上的抗蟲接種

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．