Question

【題目】萌發(fā)的禾谷類種子中淀粉酶活性較強(qiáng)，主要有α淀粉酶和β淀粉酶。α淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6以下迅速失活，而β淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15 min后失活。

實(shí)驗(yàn)材料：萌發(fā)3天的小麥種子(芽長(zhǎng)約1 cm)。

主要試劑及儀器：麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋等。

實(shí)驗(yàn)步驟：

步驟一：制作麥芽糖梯度液。取7支干凈的具塞刻度試管，編號(hào)，按表加入試劑，再將試管置于60℃恒溫水浴鍋中加熱2 min，取出后按試管號(hào)順序排列。

試劑	試管號(hào)
	1	2	3	4	5	6	7
麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液(mL)	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸餾水(mL)	2.0	1.8	1.4	1.0	X	Y	Z
斐林試劑(mL)	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

步驟二：利用萌發(fā)3天的小麥種子制備淀粉酶溶液。

步驟三：將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃恒溫水浴鍋中15 min，取出后迅速冷卻。

步驟四：另取四支試管，編號(hào)A、B、C、D，向A、B試管中各加5mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的淀粉溶液，向C、D試管中分別加入2 mL已經(jīng)處理的酶溶液(忽略其中含有的少量麥芽糖)和蒸餾水，將四支試管置于40℃恒溫水浴鍋中保溫10 min，然后將C、D試管中的溶液分別加入到A、B試管中，搖勻后繼續(xù)在40℃恒溫水浴鍋中保溫10 min。

步驟五：取A、B試管中反應(yīng)溶液各2 mL分別加入E、F試管，然后向E、F試管分別加入_____，并進(jìn)行________后，觀察顏色變化。

結(jié)果分析：將E試管中顏色與步驟一中獲得的麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計(jì)算出α淀粉酶催化效率。

請(qǐng)分析回答：

（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)定__________________。

（2）步驟一的5～7試管中加入蒸餾水的量(X、Y、Z)分別是_____________________(單位mL)。

（3）實(shí)驗(yàn)中B試管所起的具體作用是________________________。

（4）請(qǐng)補(bǔ)全步驟五的做法_________。

（5）若要測(cè)定另一種淀粉酶的活性，則需在步驟___________的基礎(chǔ)上進(jìn)行改變。

Answer 1

【答案】 小麥種子中α淀粉酶的催化效率 0.6、0.4、0 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)使用的淀粉溶液中是否存在還原糖 2mL斐林試劑 50～65 ℃水浴加熱2 min 三

【解析】試題分析：分析表格：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循單一變量原則，1～4號(hào)中溶液總量為4ml，為了保證各試管中試劑量相等，表中X應(yīng)為0.6ml、Y應(yīng)為0.4ml、Z應(yīng)為0ml。淀粉酶能將淀粉水解成還原糖，而還原糖可以用斐林試劑進(jìn)行鑒定；淀粉溶液中可能含有少量的還原糖，因此實(shí)驗(yàn)中B試管得作用是檢測(cè)實(shí)驗(yàn)使用的淀粉溶液中是否存在還原糖。

（1）β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活，而本實(shí)驗(yàn)的步驟三中，將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min，這樣β-淀粉酶已經(jīng)失活，但α-淀粉酶較耐熱，仍具有生物活性，所以本實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)定小麥種子中α-淀粉酶催化效率。

（2）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循單一變量原則，所以為了保證各試管中試劑量相等，步驟一的5～7試管中加入蒸餾水的量分別是0.6、0.4、0，使試劑量為2。

（3）斐林試劑能與還原糖溶液產(chǎn)生磚紅色沉淀，所以實(shí)驗(yàn)中B試管所起的具體作用是檢測(cè)使用的淀粉溶液中是否有還原糖。

（4）根據(jù)圖表可知，向E、F試管分別加入的是2mL斐林試劑，并在60℃水浴條件下加熱2min。

（5）萌發(fā)的禾谷類種子中淀粉酶活性較強(qiáng)，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后失活，因此要測(cè)定另一種淀粉酶的活性，則需在步驟三進(jìn)行改變，即排除α-淀粉酶的干擾。