Question

【題目】為了研究“某酸奶中乳酸菌耐藥情況”而制定的流程圖，請(qǐng)分析回答：

（1）本研究使用的細(xì)菌培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣，乳酸菌在___________（生理過程）中產(chǎn)生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈。從功能角度分析，本研究使用的培養(yǎng)基屬于___________。

（2）在利用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基滅菌時(shí)，鍋內(nèi)水加熱煮沸后，必須___________，以保證鍋內(nèi)氣壓上升，達(dá)到121℃。滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)適當(dāng)冷卻后，在___________附近倒平板。

（3）在酸奶制作過程中要嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵，通常所指的發(fā)酵條件包括______________________（至少寫出兩項(xiàng)）。一般情況下含抗生素牛奶不宜制作酸奶，原因是___________。

（4）請(qǐng)完善“檢測乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素耐藥性”實(shí)驗(yàn)操作步驟：
步驟1：分別取___________加入滅菌后冷卻至50℃左右的三組無菌培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，立即混勻，靜置凝固成平板。
步驟2：向三組培養(yǎng)基中分別接種______________________。
步驟3：將接種后的三組培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】 無氧呼吸 鑒別培養(yǎng)基 將鍋內(nèi)冷空氣徹底排除 酒精燈火焰 無菌、密閉（無氧） 抗生素抑制了乳酸菌的生長 等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水 等量相同的待檢測的乳酸菌菌種

【解析】（1）乳酸菌是厭氧細(xì)菌，進(jìn)行無氧呼吸，將葡萄糖分解成乳酸。由題干可知，乳酸與不溶性的碳酸鈣形成了溶鈣圈，液體培養(yǎng)基中無法觀察到該現(xiàn)象，表明該培養(yǎng)基從用途上說，屬于鑒別培養(yǎng)基；從物理性質(zhì)上說，屬于固體培養(yǎng)基。

（2）利用高壓蒸汽滅菌法滅菌時(shí)，將滅菌物品放入盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后，將鍋密閉，繼續(xù)加熱以保證鍋內(nèi)氣壓上升。為防止外界環(huán)境的污染，倒平板時(shí)需在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

（3）根據(jù)乳酸菌的代謝特點(diǎn)和發(fā)酵產(chǎn)物更多、更純，所以發(fā)酵過程要密閉無氧的環(huán)境且無雜菌干擾。由于抗生素本身有抑制細(xì)菌生長繁殖的特性，而乳酸菌就是細(xì)菌的一種，所以乳酸發(fā)酵過程中不能加入抗生素，否則會(huì)抑制乳酸菌的生長。

（4）由題干可知，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑闄z測乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素的耐藥性，因此青霉素和四環(huán)素的量是自變量。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，需設(shè)置對(duì)照組，其余無關(guān)變量應(yīng)保證相同且適宜。因此需取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中，再加入滅菌并冷卻至左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板；再向三組培養(yǎng)基中分別接種等量相同的待檢測的乳酸菌菌種，觀察乳酸菌形成菌落的多少。