4.回答下列有關基因表達和基因工程問題.
(1)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列.現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶,它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C
↓CGG、G
↓GATCC、
↓GATC、CCC
↓GGG.下列分析中正確的是CD(多選)
A.若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,能產生2個平滑末端
B.若用限制酶MspⅠ酶切含目的基因的DNA片段,則獲得的最長的DNA片段長度為788bp
C.若需將目的基因D導入圖2中的質粒,應選擇限制酶是BamHⅠ
D.為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌,培養(yǎng)基上需分別添加抗生素B和抗生素A
(2)假設某基因的右側序列是AAGCTTGAC∥TTCGAACTG,應選擇下表中的3酶(填數(shù)字序號)作為內切酶.
(3)請在圖3方框內畫出上題酶切割后產生的兩個末端的堿基序列.
圖4甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000對堿基)與大腸桿菌pUC18質粒(2.7kb)重組的示意圖.圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因,lacZ是顯色基因,其上的EcoRI識別位點位于目的基因插入位點的右側,其控制合成的物質能使菌落呈現(xiàn)藍色.(圖乙中深色圓點即為藍色菌落)
(4)圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素,請判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍色兩種菌落中,何種會含有重組質粒?白色.
(5)現(xiàn)用EcoRI酶切質粒,酶切后進行電泳觀察.有人說,只有出現(xiàn)長度為3.0kb和3.7kb的片段,才可以判斷該質粒已與目的基因重組成功(重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRI的識別位之間的堿基對忽略不計).你如何評價之?不對,因為還可能出現(xiàn)1.0kb和5.7kb的結果.