科學(xué)家利用植物組織培養(yǎng)的方法,已經(jīng)把許多植物的離體的組織或細(xì)胞,培養(yǎng)成了完整的植物體 。菊花組織培養(yǎng)的基本過(guò)程如下：請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）圖中 ①②過(guò)程分別代表____________、____________。

（2）進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)的基本實(shí)驗(yàn)步驟是：制備MS固體培養(yǎng)基、 、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培。培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是__________。

（3）接種若干天后，若發(fā)現(xiàn)有的錐形瓶長(zhǎng)出菊花幼苗，有的錐形瓶培養(yǎng)失敗還長(zhǎng)出雜菌菌落,原因可能是___________________________。

（4）實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)常用MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和______。在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素，植物激素的用量比例、 、__________會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,其中關(guān)鍵性的植物激素是生長(zhǎng)素和____________。（假如兩者的用量比例用x表示） ,愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是培養(yǎng)基中的x值_________（填”偏高”或”偏低”）。

在農(nóng)業(yè)用地中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度一定，該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。

（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行________處理。

（2）要從________的土壤中分離目的菌，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是：________體培養(yǎng)基且以________。若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH，應(yīng)該在各種成分都溶化后且分裝________（填“前”或“后”）進(jìn)行。對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常采用的方法是________。

（3）若對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，常用的接種方法為_____________。

（4）培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是________________或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。

（5） 為了計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量，一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0．1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為___________。

下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。

① 畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接？ 理由是 。

（2）以上圖示中基因工程的核心是 （用序號(hào)表示）,除了目的基因和標(biāo)記基因外,其上還應(yīng)包括_____________和_____________。

（3）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是 。目的基因能否在受體母豬體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是 。這需要檢測(cè)才能確定，檢測(cè)采用的方法是_____________。

（4）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是： （用數(shù)字表示）。

①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

下圖所示為科學(xué)家利用番茄葉細(xì)胞和馬鈴薯葉細(xì)胞雜交培育“番茄-馬鈴薯”植株的過(guò)程,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）①②過(guò)程使用了 酶,以去除植物的細(xì)胞壁。

（2）過(guò)程③若在化學(xué)藥劑 的作用下會(huì)發(fā)生植物原生質(zhì)體的融合。

（3）與過(guò)程④有關(guān)的細(xì)胞器主要是 , ⑤是 過(guò)程，過(guò)程⑥的實(shí)質(zhì)是 。

（4）若要獲取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培養(yǎng)到________階段，再進(jìn)行人工種皮的包裹；如用植物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)目的基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)類藥物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)到________階段即可。

（5）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在克服 方面,取得了巨大突破。

目前單克隆抗體的應(yīng)用受到越來(lái)越多的重視，如作為診斷試劑、制成生物導(dǎo)彈等。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：

（1）制備單克隆抗體涉及到 和 技術(shù)。

（2）為獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞需要多次篩選，其中第一次篩選用 培養(yǎng)基。經(jīng)初次篩選的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行 （操作）。

（3）雜交瘤細(xì)胞的增殖方式為 分裂，在此過(guò)程中其遺傳性狀 。

（4）雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi),這樣可從 或 中提出大量的單克隆抗體。

（5）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比最大的優(yōu)點(diǎn)是 。

下圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法,請(qǐng)分析回答下列有關(guān)問(wèn)題。

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是方法Ⅰ涉及的生殖方式為 ,方法Ⅱ涉及的生殖方式為 。

（2）過(guò)程①應(yīng)用的技術(shù)是 。

（3）過(guò)程②常用 激素處理,目的是使B牛 ,從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到 （時(shí)期）才能與精子結(jié)合。

（4）A牛的精子在體外完成受精,通常采用的獲能方法有培養(yǎng)法與 法。卵子受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙能夠觀察到 。防止多精入卵的生理反應(yīng)有 和 。

克隆羊的成功轟動(dòng)世界，它不僅奠定了疾病克隆性治療的基礎(chǔ)，又解決了器官移植中供體不足的問(wèn)題，同時(shí)也給人類帶來(lái)了一些過(guò)去尚未遇到的問(wèn)題。下圖為人類對(duì)克隆技術(shù)的拓展和應(yīng)用圖。請(qǐng)據(jù)圖回答以下問(wèn)題。

（1）圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有核移植和胚胎移植、胚胎分割等。其中，胚胎分割要注意____________ 。

（2）圖中兩個(gè)嬰兒長(zhǎng)大后，外貌、性格和其他特征與原型男人相似，這說(shuō)明__________具有全能性。

（3）使用培養(yǎng)基進(jìn)行胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要保證細(xì)胞生活所需營(yíng)養(yǎng)（通常要加入_______等天然成分）、溫度和pH、 __________環(huán)境；還應(yīng)使被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中（通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的 ，此外，還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液）。

（4）早期胚胎發(fā)育到__________階段以前的細(xì)胞是全能細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞可以從早期胚胎或__________中分離得到。圖中從“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)到胚胎干細(xì)胞”的培養(yǎng)過(guò)程中，必須用__________處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，使之分散成單個(gè)細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞形成組織、器官必須定向誘導(dǎo)分化,可在培養(yǎng)液中加入__________使其分化成不同類型的組織、器官,用于器官移植。胚胎干細(xì)胞不僅可應(yīng)用于器官移植，還應(yīng)用于 等領(lǐng)域。

下列不屬于相對(duì)性狀的是（ ）

A．豌豆的高莖和矮莖

B．羊毛的細(xì)毛和長(zhǎng)毛

C．人的雙眼皮和單眼皮

D．貓毛色的黑色和白色