18．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR技術(shù)）是在實驗室中以少量樣品DNA制備大量DNA的生化技術(shù)，反應(yīng)系統(tǒng)中包括微量樣品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4種脫氧核苷酸及ATP等．反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板，故DNA數(shù)以指數(shù)方式擴(kuò)增，其簡要過程如圖所示．
（1）某個DNA樣品有1000個脫氧核苷酸，已知它的一條單鏈上堿基A：G：T：C=1：2：3：4，則經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生個32DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是6200個．
（2）分別以不同生物的DNA樣品為模板合成的各個新DNA之間存在差異，這些差異是堿基的數(shù)目、比例和排列順序不同．
（3）由于DNA上的“遺傳因子”基本都是符合孟德爾的遺傳規(guī)律的，因此人類可以利用PCR技術(shù)合成的DNA進(jìn)行親子鑒定，其原理是：首先獲取被測試者的DNA，并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，取其中一樣本DNA用限制性內(nèi)切酶切成特定的小片段，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動DNA小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因．相同的基因會凝聚在一起，然后利用特別的染料在X光下，便會顯示由DNA探針凝聚于一起的黑色條碼．每個人的條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親的條碼吻合．
①限制性內(nèi)切酶能將DNA樣品切成特定的小片段，這主要體現(xiàn)了酶的A．
A．專一性             B．高效性             C．多樣性              D．作用條件溫和
②．2002年6月，我國第一張18位點的“基因身份證明”在湖北武漢誕生．人的“基因身份證明”是否終身有效？是，理由是因為同一個體的不同生長發(fā)育階段和不同組織的DNA是相同的，所以它有高度的個體特異性和穩(wěn)定性．
（4）請指出PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)錄過程的不同之處：PCR技術(shù)以DNA的兩條單鏈為模板合成子代DNA，轉(zhuǎn)錄以DNA的一條單鏈為模板合成RNA、PCR技術(shù)的原料為脫氧核苷酸，轉(zhuǎn)錄的原料是核糖核苷酸、二者反應(yīng)時的催化酶不同．（答出一點即可）

17．1909年，摩爾根開展了關(guān)于果蠅白眼性狀遺傳的研究．他將白眼雄蠅與純合的紅眼雌蠅雜交，F(xiàn)₁代都是紅眼；F₂代中，紅眼雌果蠅2459只，紅眼雄果蠅1011只，白眼雄果蠅782只．（設(shè)有關(guān)基因用R、r表示）
（1）在上述果蠅眼色中，紅眼是顯性性狀，其遺傳符合基因分離定律．
（2）一個處于平衡狀態(tài)的果蠅群體中r基因的頻率為a．如果取F₂的一只白眼雄果蠅與一只正常的紅眼雌蠅雜交．則后代中白眼雌蠅的概率為$\frac{a}{2（a+1）}$．
（3）摩爾根的學(xué)生布里奇斯在重復(fù)摩爾根的果蠅伴性遺傳實驗時，又發(fā)現(xiàn)了例外現(xiàn)象．他觀察了大量的白眼雌蠅與紅眼雄蠅的雜交后代，發(fā)現(xiàn)大約每2000個子代個體中，有一個可育的白眼雌蠅或不育的紅眼雄蠅．已知幾種性染色體異常果蠅的性別、育性等如表所示．

染色體組成	XXY	XO	YO	XYY	XXX
形狀	雌性，可育	雄性，不育	死亡	雄性，可育	死亡

布里奇斯在分析這些例外現(xiàn)象的產(chǎn)生是由于X染色體在減數(shù)第二次分裂后期（填具體時期）不分開造成的，產(chǎn)生了XX或0的卵細(xì)胞．據(jù)此分析，請推測例外的可育白眼雌蠅最多能產(chǎn)生了X^r，X^rX^r，X^rY，Y的卵細(xì)胞．據(jù)此分析，請推測例外的可育白眼雌蠅最多能產(chǎn)生X^r，X^rX^r，X^rY，Y的卵細(xì)胞．
（4）果蠅之所以是遺傳學(xué)研究的良好材料的理由是相對性狀區(qū)分明顯、繁殖周期短、子代個體數(shù)量多等．

16．如圖是人體生命活動部分調(diào)節(jié)示意圖．其中甲～丙表示細(xì)胞，①～③表示相關(guān)過程，X～Z表示相關(guān)激素，X激素是一種糖蛋白．請分析回答：

（1）當(dāng)細(xì)胞外液滲透壓升高時，刺激下丘腦中滲透壓感受器產(chǎn)生興奮，導(dǎo)致激素[Z]抗利尿激素分泌增加，該激素的靶細(xì)胞為腎小管和集合管細(xì)胞．
（2）如果用含激素Y的飼料飼喂正常動物，則激素X的分泌量變化是減少，這種調(diào)節(jié)方式屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié)．如果用含激素X的飼料飼喂正常動物，則①、②過程的生理效應(yīng)無（“有”或“無”）明顯變化．
（3）“Graves氏病”是由于機體產(chǎn)生針對促甲狀腺激素受體的抗體，而該種抗體能發(fā)揮與促甲狀腺激素相同的生理作用，但甲狀腺激素不會影響該抗體的分泌（如圖）．與正常人相比，“Graves氏病”患者Y激素的分泌量增加．
（4）由圖可知，神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)是機體維持穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)機制．
（5）垂體除能分泌生長激素外，還能分泌促性腺激素、X等，說明垂體具有調(diào)節(jié)、管理其它某些內(nèi)分泌腺作用．

15．下面是某研究小組以番茄為材料所做的相關(guān)實驗及其結(jié)果，請回答相關(guān)問題．

（1）由甲圖可推知，與M點相比，N點限制單株光合強度的外界因素是光照強度、二氧化碳濃度（寫出兩種），甲實驗給我們的啟示是，在栽培農(nóng)作物時要注意合理密植．
（2）測得該植物一晝夜的O₂凈釋放量為300mg，圖中陰影部分所表示的O₂釋放量大于（填“大于”、“等于”或“小于”）300mg．假設(shè)該植物在24小時內(nèi)呼吸速率不變，則該植物一天通過光合作用產(chǎn)生的O₂總量是540mg．光合作用速率最高時，光合作用每小時固定CO₂的量是77mg．若適當(dāng)增加植物生長環(huán)境中CO₂的濃度，C點將向右（左或右）移動．在生產(chǎn)實踐中，常采用施用農(nóng)家肥的方法促進(jìn)植物生長，其原理土壤中的微生物通過分解作用（或呼吸作用）分解有機物產(chǎn)生CO₂和無機鹽，能促進(jìn)其光合作用．
（3）將對稱葉片上側(cè)遮光下側(cè)曝光（如圖丙），并采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄗ柚箖刹糠种�間的物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)移．在適宜光照下照射12小時后，從兩側(cè)截取同等面積的葉片，烘干稱重，分別記為a和b（單位：g）．則b-a所代表的是12小時內(nèi)上側(cè)截取葉片光合作用制造的有機物總量．

14．如圖是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請分析回答下列問題．

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植．
（2）用激素處理的目的是使B牛促性腺激素，從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（時期）才能與精子結(jié)合．
（3）A牛的精子要與B牛的卵細(xì)胞結(jié)合，完成受精作用，必須先獲能．卵子受精的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙能夠觀察到兩個極體．
（4）生產(chǎn)上常用桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行胚胎移植．若希望同時獲得多個性狀相同的家畜個體，可以使用胚胎分割技術(shù)．

13．細(xì)胞工程根據(jù)操作對象的不同，可分為植物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞工程兩大領(lǐng)域．近年來，細(xì)胞工程領(lǐng)域成果迭出．請回答下列相關(guān)問題：
（1）應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可以高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖．植物組織培養(yǎng)技術(shù)所依據(jù)的生物學(xué)原理是植物細(xì)胞的全能性．欲使利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育的植株無病毒，選材時一般選取莖尖、芽尖或根尖．
（2）應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，能創(chuàng)造出靠常規(guī)雜交育種無法得到的作物新品種．在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．進(jìn)行原生質(zhì)體間的融合時，常使用的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇（PEG）．
（3）應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，可以大量地生產(chǎn)各種抗病疫苗．在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)之前，需先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊，使其分散成單個細(xì)胞．進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，所需氣體主要有O₂和CO₂；另外，所用的合成培養(yǎng)基中通常需加入血清、血漿等一些天然成分．
（4）應(yīng)用雜交瘤技術(shù)，能為人類提供診治腫瘤的單克隆抗體．制備單克隆抗體過程中，經(jīng)選擇培養(yǎng)得到的雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞．與常規(guī)的抗體相比，單克隆抗體具有的顯著特點是特異性強、靈敏度高，并可能大量制備．

12．我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗，其有效成分是一種叫做乙肝表面抗原的蛋白質(zhì)（S蛋白，對應(yīng)的基因為S基因），請回答下列問題．
（1）在這項技術(shù)中，S基因?qū)儆谀康幕�因�?br />（2）用同一種限制酶處理S基因和運載體，并用DNA連接酶使之結(jié)合，這里的DNA片段兩兩結(jié)合的產(chǎn)物有3種，除了S基因，構(gòu)建好的表達(dá)載體還應(yīng)具有啟動子、終止子、標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu)．
（3）將表達(dá)載體導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞，篩選得到工程細(xì)胞．使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)工程細(xì)胞時，通常需要加入動物血清等天然成分．工程細(xì)胞在生長過程中有貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象，需要定期使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以便于分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中，定期收集培養(yǎng)液，分離純化即可得到所需產(chǎn)品．

11．請據(jù)圖回答下列問題：

（1）在培育轉(zhuǎn)基因牛過程中，②過程常用的方法是顯微注射法．轉(zhuǎn)基因�？赏ㄟ^分泌乳汁來產(chǎn)生人生長激素，在基因表達(dá)載體中，人生長激素基因的首端必須含有啟動子，其作用是能夠被RNA聚合酶識別并結(jié)合從而啟動轉(zhuǎn)錄過程．
（2）prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，Ⅱ最可能是B細(xì)胞（漿細(xì)胞）細(xì)胞，Ⅲ代表的細(xì)胞具有無限增殖和產(chǎn)生特異性抗體的特點．
（3）一般情況下農(nóng)桿菌不能感染的植物是單子葉植物，利用農(nóng)桿菌自然條件下感染植物的特點，能實現(xiàn)目的基因?qū)�入到植物�?xì)胞染色體的DNA上．

10．2009年10月，我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻“華恢1號”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書．下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）④過程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，利用植物細(xì)胞的全能性的基本原理．
（2）殺蟲基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計并人工合成的蛋白質(zhì)，這屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)范疇．
（3）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造．如圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點），據(jù)圖分析：

①人工改造時，要使抗蟲基因表達(dá)，還應(yīng)插入啟動子．
②人工改造時用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的tms和tar（基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會引起細(xì)胞的無限分裂和生長；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點，有利于目的基因準(zhǔn)確插入．第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高、轉(zhuǎn)化效率等．
③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒．分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長的現(xiàn)象是在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長．
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為${\;}_{-G}^{-GTGCA}$，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．

9．某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因．利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題：
（1）從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增．將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理基因重組．
（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制，也不能轉(zhuǎn)錄．
（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用SalⅠ和HindⅢ兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性．
（4）為了確定抗鹽煙草培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的抗鹽基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用抗原-抗體雜交的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性．