下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

(1)若圖2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，現(xiàn)在要培養(yǎng)乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需將該基因通過 （方法）注入到羊的 中，則發(fā)育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。這一過程涉及到以下哪些過程（多選） 。

A．DNA自我復(fù)制B．DNA以其一條鏈為模板合成RNA

C．RNA自我復(fù)制D．按照RNA上密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)

(2)若圖2中目的基因D需要同時使用MetⅠ和PstⅠ才能獲得，而圖1所示的質(zhì)粒無相應(yīng)的限制酶酶切位點。所以在該質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時，需要對質(zhì)粒改造，構(gòu)建新的限制酶酶切位點。試幫助完成構(gòu)建需要的限制酶酶切位點的思路（選填①-⑤）：

①EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA連接酶⑤DNA聚合酶

首先用 處理質(zhì)粒；然后用 處理質(zhì)粒，使被切開的質(zhì)粒末端連接上相應(yīng)的脫氧核苷酸；再用 處理質(zhì)粒，形成了的限制酶酶切割位點，它可被②識別。

(3)檢測篩選是一個重要步驟。圖3表示在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種方法與培養(yǎng)方法，以檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入大腸桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有 、 。從篩選結(jié)果分析，含目的基因的是 （填編號）菌落中的細(xì)菌。

⑷DNA分子中，一條鏈的兩個核苷酸通過 連接。如要檢測目的基因是否成功表達(dá)，須提取培養(yǎng)后大腸桿菌解的 ，用相應(yīng)抗體檢測。

下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的敘述，錯誤的是

A.通過消毒不能殺死物體內(nèi)所有的微生物

B.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計算樣品中含有的活菌實際數(shù)目

C.平板劃線法不可用于微生物的計數(shù)

D.使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌后才能丟棄

下面是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意圖，請據(jù)圖判斷下列說法中正確的是（ ）

A. 制作果酒時，先去除爛子粒和枝梗，再用清水沖洗掉污物

B. 榨汁前，榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶都需要用體積分?jǐn)?shù)為70％的鹽酸消毒

C. A過程是酒精發(fā)酵，A過程結(jié)束后，只需要提高一定的環(huán)境溫度就能產(chǎn)生果醋

D. 導(dǎo)致發(fā)酵產(chǎn)物不同的重要因素是溫度、時間、菌種等

1958年，美國科學(xué)家斯圖爾德用胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)出完整的胡蘿卜植株，該過程不需要

A.用酶解法去掉細(xì)胞壁

B.在無菌條件下切取具細(xì)胞核的細(xì)胞

C.適合的光照和溫度

D.在培養(yǎng)基中加入一定量的營養(yǎng)物質(zhì)和激素

腐乳因口感好、營養(yǎng)豐富等特點，成為人們喜愛的食品之一。下列有關(guān)腐乳制備的操作正確的是

A．毛霉菌絲大量繁殖時可形成有害的“硬皮”，不能食用

B．制作腐乳時，容器要進(jìn)行滅菌，裝豆腐時操作要緩慢以防止豆腐碎裂

C．逐層增加鹽的用量可以析出豆腐中的水分也可以防止雜菌污染

D．不同顏色的腐乳制備過程有很大不同

要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來，應(yīng)將它們接種在

A.加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上

B.不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上

C. 加入氮源，不加殺菌劑的培養(yǎng)基上

D.不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上

以下關(guān)于泡菜制作過程的說法中，錯誤的是

A.泡菜制作過程產(chǎn)生的亞硝酸鹽有可能轉(zhuǎn)化為亞硝胺，亞硝胺具有致癌作用

B.泡菜腌制時間的長短會影響亞硝酸鹽含量

C. 新鮮蔬菜中亞硝酸鹽的含量低

D.乳酸菌在有氧的環(huán)境下大量繁殖并發(fā)酵生成乳酸

下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，錯誤的是

A.滅菌和消毒的主要區(qū)別在于是否殺死孢子和芽孢

B.耐高溫的、需要保持干燥的物品可以采用干熱滅菌

C.培養(yǎng)基滅菌結(jié)束后應(yīng)該馬上倒平板以防止其凝固

D.用酒精擦拭雙手只能消毒，不能起到滅菌作用

用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時

①可以用相同的培養(yǎng)基 ②都需要使用接種針進(jìn)行接種

③都需要在火焰旁進(jìn)行接種 ④都可以用來計數(shù)活菌

A．②④ B．③④ C．①③ D．①②

在微生物的實驗室培養(yǎng)實驗中，將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37℃恒溫箱的目的是

A. 對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用

B. 為了下次接種時再使用

C. 讓未接種的培養(yǎng)基上也能長出菌落

D. 對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌