Question

【題目】萌發(fā)的小麥種子中有α淀粉酶和β淀粉酶。α淀粉酶較耐熱，但在pH為3.6下可迅速失活，而β淀粉酶不耐熱，在70 ℃條件下15 min后失活。

實驗材料和用具：萌發(fā)的小麥種子、麥芽糖標準液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、水浴鍋等。

實驗步驟：一：制作麥芽糖梯度液。取7支干凈的試管，編號，按表加入試劑后60 ℃水浴加熱2 min。

試劑	試管號
	1	2	3	4	5	6	7
麥芽糖標準液/mL	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸餾水/mL	2.0	1.8	1.4	1.0	X	Y	Z
斐林試劑/mL	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

二：用萌發(fā)的小麥種子制備淀粉酶溶液。

三：將裝有淀粉酶溶液的試管70 ℃水浴15 min后迅速冷卻。

四：另取4支試管，編號A、B、C、D，向A、B試管中各加5 mL 5%淀粉溶液，向C、D試管中各加2 mL已經(jīng)處理的酶溶液(忽略其中含有的少量麥芽糖)和蒸餾水，將4支試管40 ℃水浴10 min。將C、D試管中的溶液分別加入到A、B試管中，搖勻后繼續(xù)40 ℃水浴10 min。

五：取A、B試管中反應(yīng)溶液各2 mL分別加入E、F試管，然后向E、F試管分別加入____________________，并進行________________，觀察顏色變化。

結(jié)果分析：將E試管中顏色與步驟一中獲得的麥芽糖標準液進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出α淀粉酶催化效率。請分析回答：

(1)本實驗的目的是測定小麥種子中___________________________________。

(2)步驟一的5～7試管中加入蒸餾水的量(X、Y、Z)分別是________、________、________(單位mL)。

(3)實驗中B試管所起的具體作用是檢測實驗使用的淀粉溶液中___________。

p>(4)若要測定另一種淀粉酶的活性，則需在第________步驟進行改變。

Answer 1

【答案】2 mL斐林試劑， 60 ℃水浴加熱2 min后

（1）α淀粉酶催化效率

（2）0.6 0.4 0

（3）是否存在還原糖

（4）三

【解析】步驟五.A試管和B試管都加入 5 mL 5%淀粉溶液，分別加入同樣溫度處理后的C：2 mL已經(jīng)處理的酶溶液和D蒸餾水，上述已處理的酶溶液是α淀粉酶溶液，因為β淀粉酶不耐熱，在70 ℃條件下15 min后失活。在第三步處理后β淀粉酶已經(jīng)失活。淀粉被α淀粉酶催化分解成還原糖，故要分別向E和F試管加入2 mL斐林試劑，60 ℃水浴加熱2 min后溶液會出現(xiàn)磚紅色。

（1）該實驗測定α－淀粉酶催化淀粉水解產(chǎn)生還原糖的情況，故實驗?zāi)康氖菧y定小麥種子中α淀粉酶催化效率。

（2）麥芽糖梯度液的每一個試管的溶液體積（麥芽糖標準液和蒸餾水之和）都是2 mL，故X、Y、Z分別是0.6、0.4和0。

（3）試管B加入的是淀粉溶液，向其加入D等量的蒸餾水，起著對照作用，目的是檢測實驗使用的淀粉溶液中是否含有還原糖，排除實驗結(jié)果的干擾。

（4）根據(jù)α－淀粉酶不耐酸，在pH為3.6、0℃下可迅速失活，而β－淀粉酶耐酸的特性，只需使α－淀粉酶失去活性，即可得到β－淀粉酶保持活性而α－淀粉酶失活的酶溶液，也即將步驟三換成：將步驟一中制取的酶液置于pH為3.6、溫度為0℃的環(huán)境中短暫時間。