Question

13．據(jù)報道，科學(xué)家把帶有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因片段，整合到羊的乳腺上皮細(xì)胞DNA中，再將帶有外源基因的乳腺上皮細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中，培育出了一只克隆羊，其乳汁中可以提煉出含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的物質(zhì)．請據(jù)此回答下列問題：
（1）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入乳腺上皮細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（2）若要檢測乳腺上皮細(xì)胞染色體上是否含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）已知BamHⅠ與BglⅡ的識別序列及切割位點如圖所示：

用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若干循環(huán)后和序列明顯增多，該過程中DNA連接酶能催化磷酸二酯鍵的形成．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動物受體細(xì)胞常用顯微注射法．
（2）若要檢測乳腺上皮細(xì)胞染色體上是否含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）圖中DNA兩片段經(jīng)酶切后共得到四個片斷，切割后形成的黏性末端相同，其中有二個片段組成了已知序列，則另一序列必為剩余的二個片段組成．DNA連接酶催化連接的是磷酸二酯鍵．
故答案為：
 （1）顯微注射法
（2）DNA分子雜交
（3）　        磷酸二酯

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，了解基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能運(yùn)用所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．