Question

（1）限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)．
①請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端．

 

②請(qǐng)畫(huà)出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端．

 

③在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來(lái)？

 

為什么？

 

（2）請(qǐng)根據(jù)所提供的實(shí)驗(yàn)材料用具設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證“重力影響生長(zhǎng)素的重新分配”．實(shí)驗(yàn)材料用具：若干相同的燕麥胚芽鞘尖端是、若干相同的去掉尖端的胚芽鞘、一個(gè)實(shí)驗(yàn)支架（支架的材料托中，放置了6塊已編號(hào)的相同瓊脂塊．相鄰兩個(gè)瓊脂塊之間用不透水的云母片完全割開(kāi)）．
①寫(xiě)出主要實(shí)驗(yàn)步驟：
②預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
放置a₁瓊脂塊的胚芽鞘比放置a₂瓊脂塊的胚芽鞘

 

．
放置a₃瓊脂塊的胚芽鞘比放置a₂瓊脂塊的胚芽鞘

 

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放置A₃瓊脂塊的胚芽鞘

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),生長(zhǎng)素的產(chǎn)生、分布和運(yùn)輸情況,生長(zhǎng)素的作用以及作用的兩重性

專(zhuān)題：

分析：限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端．
在分析材料托中瓊脂塊中生長(zhǎng)素分布時(shí)，利用重力影響的因素，導(dǎo)致生長(zhǎng)素分布情況為A3＞A2＞A1=a1＞a2＞a3，由此解題即可．

解答： 解：（1）①據(jù)題意可知，限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，并且質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，因此首先補(bǔ)全下面一條鏈的核苷酸序列，并在上下兩條切點(diǎn)處分割成兩個(gè)粘性末端即可．
②據(jù)題意可知，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)，并且限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，因此在目的基因的兩側(cè)進(jìn)行切割共形成了四個(gè)相同的粘性末端．
③限制酶Ⅰ和Ⅱ切割后產(chǎn)生的粘性末端相同，即均產(chǎn)生GATC序列，因此可以用DNA連接酶連接起來(lái)．
（2）①將三個(gè)胚芽鞘尖端分別放置在實(shí)驗(yàn)支架的材料托的瓊脂塊正中央（一半在A，另一半在a上），由于三個(gè)胚芽鞘所處的具體位置不同，生長(zhǎng)素受重力影響的程度不同，極性運(yùn)輸后在瓊脂塊上生長(zhǎng)素量分布不同．
②在A1與a1處胚芽鞘受重力的影響是均勻的，A1與a1兩邊分配均勻；在A2和a2處胚芽鞘受重力的影響是不均勻的，A2處比a2處生長(zhǎng)素分布的較多；在A3和a3處胚芽鞘受重力的影響是最大的，A3處比a3處生長(zhǎng)素分布的較多；受重力影響后6塊瓊脂塊中生長(zhǎng)素分布的量依次為A3＞A2＞A1=a1＞a2＞a3．因此，由于生長(zhǎng)素的量a1＞a2，放置a1瓊脂塊的胚芽鞘比放置a2瓊脂塊的胚芽鞘彎曲度大；生長(zhǎng)素的量a2＞a3，放置a3瓊脂塊的胚芽鞘比放置a2瓊脂塊的胚芽鞘彎曲度小；A3處生長(zhǎng)素分布的量最多，因此放置A3瓊脂塊的胚芽鞘彎曲度最大．
故答案為：
（1）①

②

③能，因?yàn)樾纬傻酿ば阅┒讼嗤?br />（2）①主要實(shí)驗(yàn)步驟第一步：將3個(gè)胚芽鞘尖端分別放置在實(shí)驗(yàn)支架材料托的瓊脂塊上．第二步：將實(shí)驗(yàn)支架在黑暗條件下放置一段時(shí)間．第三步：移走胚芽鞘尖端，然后將材料托中的瓊脂塊取出，分別放在6個(gè)切去尖端的胚芽鞘切面的一側(cè)．第四步：分別測(cè)量和比較不同處理的胚芽鞘彎曲程度． 
②預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：彎曲度大  彎曲度小   彎曲度最大

點(diǎn)評(píng)：本題考查了限制酶以及重力影響生長(zhǎng)素的重新分配的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，意在考查考生的理解能力、作圖能力以及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的能力，具有一定的難度．