Question

基因工程中pIJ702是一種常用質粒（圖1），其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列．

	pIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5.7kb	6.7kb
ClaⅠ	5.7kb	2.2kb，4.5kb
PstⅠ	5.7kb	1.6kb，5.1kb

（1）．以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上0.4kb（1kb=1000對堿基）的SacⅠ/SphⅠ片段，構成重組質粒pZHZ8．上述兩種質粒的限制酶酶切片段長度列在表4中．由此判斷目的基因的片段有

 

kb，以上的操作還需要的一種工具酶是

 

．
（2）重組質粒pZHZ8上的標記基因是

 

，含有重組質粒pZHZ8的菌落呈

 

色．
（3）若要檢測重組質粒pZHZ8上的目的基因，可以用

 

作探針進行雜交．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示為pIJ702質粒的結構示意圖，質粒是雙鏈環(huán)狀DNA分子．圖表表示兩種質粒的限制酶酶切片段長度．

解答： 解：（1）由于用BglⅡ等酶切割后，pIJ702長度為5.7kb，而pZHZ8長度都為6.7kb，增加了1kb；而目的基因置換pIJ702上0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段，所以目的基因的片段有1.4kb．形成重組質粒需要DNA連接酶將目的基因和質粒連接起來．
（2）重組質粒pZHZ8上的標記基因是tsr基因，mel是黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落，由于mel基因部分被替換后，鏈霉菌菌落不能變黑，而成為白色．
（3）若要檢測重組質粒pZHZ8上的目的基因，可以用放射性同位素標記的目的基因作探針進行雜交．
故答案為：
（1）1.4 DNA連接酶
（2）tsr基因    白
（3）放射性同位素標記的目的基因

點評：本題結合圖表，考查基因工程、遺傳信息轉錄和翻譯，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能根據(jù)圖表中的信息答題，屬于考綱理解和應用層次的考查．