Question

【題目】將PVY病毒外殼蛋白基因(PVY-CP)導(dǎo)入馬鈴薯，并使之表達(dá)即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯。圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，PVY-CP可以從質(zhì)粒A中獲取；質(zhì)粒B是選用的運(yùn)載體，另已知部分限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)：

請(qǐng)結(jié)合圖像，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答問(wèn)題：

(1)含有PVY-CP的質(zhì)粒A保存在某細(xì)菌群體中，各個(gè)細(xì)菌含有相關(guān)不同的基因，這樣的細(xì)菌群體稱為_(kāi)____________。

(2)關(guān)于步驟②中Ⅺenow酶的猜測(cè)，合理的是_____________。

A．催化合成的片段起引物作用

B．可以將DNA片段的粘性末端變成平末端

C．能催化DNA鏈的合成

D．與DNA連接酶的功能相同

(3)步驟④中應(yīng)該使用的限制酶是________。

(4)利用基因工程將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞，目前采用最多的方法是 。該方法首先需要將質(zhì)粒C導(dǎo)入________中，進(jìn)而轉(zhuǎn)化馬鈴薯薯片，然后通過(guò)________技術(shù)獲得抗PVY病毒馬鈴薯苗。

Answer 1

【答案】（1）基因文庫(kù) （部分基因組文庫(kù)、基因組文庫(kù)給分） （2）BC （3）BamHⅠ、SmaⅠ(僅答出一種酶給1分) （4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 農(nóng)桿菌 植物組織培養(yǎng)

【解析】（1）將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入受體菌群體儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，為基因文庫(kù)。（2）據(jù)圖分析，該過(guò)程表示PCR技術(shù)，該DNA片段是要獲得PVY-CP，A錯(cuò)。Klenow酶將DNA的粘性末端變成平末端，需要合成新DNA片段與之配對(duì)，B、C正確。沒(méi)有起到連接DNA片段的作用，D錯(cuò)。（3）據(jù)表格分析，質(zhì)粒B用BamHⅠ和SmaⅠ切割后，剛好一端為平末端，與步驟③DNA的平末端互補(bǔ)。另一端粘性末端，與步驟③DNA的粘性末端互補(bǔ)，再用DNA連接酶連接為重組質(zhì)粒。（4）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行轉(zhuǎn)化，首先需要將質(zhì)粒C導(dǎo)入農(nóng)桿菌，進(jìn)而轉(zhuǎn)化馬鈴薯，然后通過(guò)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。