Question

6．如圖表示科學家培育耐寒生物的過程，請回答：

（1）從cDNA文庫中獲取的目的基因無（有/無）啟動子．實現(xiàn)①過程常用PCR技術，該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物．
（2）②表示基因表達載體，其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因．
（3）轉基因技術是否成功，需要對受體細胞進行分子水平的檢測，首先是用DNA分子雜交技術檢測受體細胞染色體上的DNA上是否插入目的基因，這種方法需要遵循堿基互補配對原則．
（4）若要培育抗凍能力強的轉基因羊，可將魚的抗凍蛋白基因導入羊的受精卵中，培育該轉基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的胚胎移植技術．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉錄產(chǎn)生的多種互補DNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫這種生物的cDNA文庫，由于啟動子不能轉錄，因此cDNA文庫中沒有基因的啟動子；PCR技術可在體外大量擴增目的基因，該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物．
（2）②表示基因表達載體，其中標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因．
（3）DNA分子雜交技術遵循堿基互補配對原則．
（4）培育轉基因動物時，常以受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高；培育該轉基因動物的最后一道“工序”是胚胎移植．
故答案為：
（1）無      PCR      引物
（2）基因表達載體    鑒別受體細胞中是否含有目的基因
（3）堿基互補配對
（4）受精卵     胚胎移植

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題．