Question

10．上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛．他們還研究出一種可大大提高基因表達水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標(biāo)志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進了一大步．回答下列與基因工程相關(guān)的問題：
（1）人白蛋白基因可以從基因文庫中獲取，用到的工具酶是：限制酶
（2）之后需要進行構(gòu)建基因表達載體，此步驟是基因工程的核心．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點分別是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-．如圖表示四種質(zhì)粒和目的基因，其中，箭頭所指部位為酶的識別位點，質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因．適于作為圖示目的基因運載體的是A．

（3）提高“基因表達水平”的意思是：提高轉(zhuǎn)基因動物乳汁中人白蛋白的含量．為檢測人白蛋白是否成功表達，可采用③（填序號）技術(shù)．
①核酸分子雜交�、诨�因序列分析　 ③抗原-抗體雜交�、躊CR
（4）若想獲得多個新個體，可在早期培養(yǎng)過程中用胚胎分割 技術(shù)處理胚胎就行．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程中獲取目的基因需要用到限制酶．
（2）A、用限制酶MumⅠ切割該質(zhì)粒后，不會破壞標(biāo)記基因，而且還能產(chǎn)生與目的基因兩側(cè)黏性末端相同的末端，適于作為目的基因的運載體，A正確；
B、該質(zhì)粒沒有標(biāo)記基因，不適于作為目的基因的運載體，B錯誤；
C、該質(zhì)粒含有標(biāo)記基因，但用限制酶切割后會被破壞，因此不適于作為目的基因的運載體，C錯誤；
D、該質(zhì)粒含有標(biāo)記基因，但用限制酶切割后會被破壞，因此不適于作為目的基因的運載體，D錯誤．
故選：A．
（3）基因工程的目的基因是人白蛋白基因，其表達產(chǎn)物是人白蛋白．檢測白蛋白是否成功表達，可以用抗原抗體雜交法．
（4）在早期培養(yǎng)過程中用胚胎分割技術(shù)處理胚胎，可以獲得多個遺傳性狀相同的新個體．
故答案為：
（1）限制酶        
（2）A
（3）乳汁中人白蛋白的含量       ③
（4）胚胎分割

點評 本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、基因工程的操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．