Question

同學(xué)們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸�物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4?7H2O	0.2g
葡萄糖	1g
尿素	10g
瓊脂	15g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）簡述土壤中可分解尿素的細(xì)菌的鑒定方法及原理：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入

 

指示劑，細(xì)菌合成的

 

將尿素分解為

 

，pH升高，使指示劑變?yōu)榧t色．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的

 

和

 

，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，原因是

 

．
（4）如圖是利用

 

法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（5）關(guān)于如圖的操作方法和結(jié)果，敘述正確的是

 

．
A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌     B．劃線操作須在火焰上進(jìn)行     C．在5區(qū)域中才可以提到所需菌落         D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),以尿素為氮源，測定能生長的細(xì)菌的數(shù)量

專題：

分析：尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠把尿素分解為氨使pH升高，與酚紅指示劑反應(yīng)后呈紅色．篩選尿素分解菌要使用一尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，篩選分離時常用稀釋涂布平板法和平板劃線法．
平板劃線的操作的基本步驟是：
（一）、右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞．
（二）、左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面．
（三）、燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連．
（四）、將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．

解答： 解：（1）尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠把尿素分解為氨使pH升高，與酚紅指示劑反應(yīng)后呈紅色．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是只有尿素分解菌能夠以尿素為氮源進(jìn)行利用，而其他微生物不能利用，使用尿素分解菌屬于目的菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）尿素分解菌所需要的氮源是尿素，碳源是培養(yǎng)基中的葡萄糖．尿素分解菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，所以實驗中需要振蕩培養(yǎng)為其提供更多的氧氣．
（4）固體培養(yǎng)基上的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．圖示為利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（5）在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒．
故答案為：
（1）酚紅   脲酶    氨
（2）選擇      
（3）尿素    葡萄糖     為目的菌提供氧氣
（4）平板劃線
（5）D

點評：本題主要考查尿素分解菌的篩選與分離，意在強(qiáng)化學(xué)生對相關(guān)知識點的識記與理解．