Question

9．如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖，請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）正確的操作順序是C→B→E→D→A（用字母和箭頭表示）．
（2）如圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是加速細(xì)胞的破裂和降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出．
（3）如圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過(guò)充分預(yù)冷的才能使用，該步驟的目的是提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA．
（4）為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加二苯胺試劑后沸水浴，如果出現(xiàn)藍(lán)色則證明該絲狀物的主要成分為DNA．

Answer 1

分析 DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；
②DNA不容易酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；
③DNA對(duì)于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；
④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色．

解答 解：（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水，破碎細(xì)胞→過(guò)濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A．
（2）C加蒸餾水是使血細(xì)胞吸水破裂，E加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度降低，析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過(guò)充分預(yù)冷的才能使用，以便除去溶于酒精的雜質(zhì)，提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA．
（4）DNA鑒定用二苯胺水浴加熱，呈藍(lán)色．
故答案為：
（1）C→B→E→D→A
（2）加速細(xì)胞的破裂 降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出
（3）充分預(yù)冷 提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA
（4）二苯胺 藍(lán)色

點(diǎn)評(píng) 本題考查了DNA的粗提取與鑒定的相關(guān)知識(shí)，包括實(shí)驗(yàn)的原理、操作步驟等，意在考查考生的識(shí)記能力和實(shí)驗(yàn)操作能力，難度適中．考生要識(shí)記材料選擇的原則、實(shí)驗(yàn)原理，注意DNA雖能溶于氯化鈉溶液，但是在O.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低．