Question

金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病．金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．如圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關(guān)問題．

（1）操作中在血平板上的接種方法是

 

，接種操作前后需要對接種工具進(jìn)行

 

滅菌．
（2）用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是

 

．
（3）在制備血平板時需將pH調(diào)節(jié)至

 

（“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養(yǎng)基

 

后，再加入適量血液．按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于

 

培養(yǎng)基．
（4）多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上均出現(xiàn)

 

的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，需要對本次操作進(jìn)行完善，完善的方案是

 

．
（5）為了檢測其中某種菌對于抗生素的敏感性，取該單菌落適當(dāng)稀釋，接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板．將分別含有A、B兩種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A

 

；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該病菌對抗生素B

 

．為方便后續(xù)使用該菌種，可將菌液用

 

的方法長期保存．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：（1）微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
（2）培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：
①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．
（4）對相應(yīng)抗生素敏感的細(xì)菌，在含有抗生素的培養(yǎng)基上不能生長；反之，則能生長．

解答： 解：（1）使用接種環(huán)進(jìn)行接種應(yīng)該只用平板劃線法；接種工具滅菌的方式是灼燒滅菌．
（2）用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是分離出金黃色葡萄球菌．
（3）血液是堿性的，所以培養(yǎng)基應(yīng)該調(diào)至堿性；滅菌法方法是高壓蒸汽滅菌法，所以應(yīng)該等到培養(yǎng)基冷卻后加入血液，否則會破壞血細(xì)胞；由于該培養(yǎng)基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個實驗要這是對照實驗，對照實驗的設(shè)計是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶．
（5）對相應(yīng)抗生素敏感的細(xì)菌，在含有抗生素的培養(yǎng)基上不能生長；反之，則能生長．含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B不敏感；菌種長期保存，用甘油管藏的方法．
故答案為：（1）平板劃線法      灼燒    
（2）分離出金黃色葡萄球菌
（3）微堿性   冷卻     鑒別
（4）周圍存在透明圈    設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組
（5）敏感  不敏感  甘油管藏

點評：在本題中設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度，對照實驗的設(shè)計的重點是單一變量原則，在本題中單一變量的原則的設(shè)計是在培養(yǎng)基中是否加入鮮牛奶．