Question

14．有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株．回答問題：
（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強(qiáng)．
（3）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（4）為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋處理．為了排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響（培養(yǎng)基被污染），需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照．
（5）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
2、常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（3）分離純化菌種時(shí)，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細(xì)菌細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便純化菌種．
（4）為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋處理．為了排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響（培養(yǎng)基被污染），需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照．
（5）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染．
故答案為：
（1）原油       選擇
（2）強(qiáng)
（3）平板劃線法          稀釋涂布平板法
（4）梯度稀釋         實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響（培養(yǎng)基被污染）
（5）高壓蒸汽滅菌         火焰

點(diǎn)評 本題的知識點(diǎn)是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點(diǎn)，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識，準(zhǔn)確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查．