Question

生物-選修1：生物技術(shù)實(shí)踐
金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾�。�金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．下圖為定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題．
（1）按細(xì)胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于

 

生物，從培養(yǎng)過(guò)程分析，金黃色葡萄球菌可進(jìn)行

 

呼吸．
（2）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分包括

 

，用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是

 

．
（3）操作中在血平板上的接種方法是

 

，接種操作前后需要對(duì)接種工具進(jìn)行

 

滅菌．
（4）在制備血平板時(shí)需將pH調(diào)節(jié)至

 

 （“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養(yǎng)基

 

后，再加入適量血液．按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于

 

培養(yǎng)基．
（5）經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)

 

的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對(duì)本操作進(jìn)行完善，完善的方案是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：（1）微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及生長(zhǎng)因子．
（2）培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：
①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．
（4）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們?cè)诤�有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌．

解答： 解：（1）如何判斷細(xì)菌：帶“菌”字的生物中，“菌”字前有“桿”“球”“弧”“螺旋”等表示形態(tài)的字的都是細(xì)菌，如大腸桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、霍亂弧菌等都是細(xì)菌，葡萄球菌屬于細(xì)菌，屬于原核生物；在培養(yǎng)的過(guò)程中由于沒(méi)有密閉培養(yǎng)，所以葡萄球菌屬于有氧呼吸的菌種．
（2）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基中含有蛋白質(zhì)，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽；高濃度的鹽溶液可以對(duì)微生物進(jìn)行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中．
（3）使用接種環(huán)進(jìn)行接種應(yīng)該只用平板劃線法；接種工具滅菌的方式是灼燒．
（4）血液是堿性的，所以培養(yǎng)基應(yīng)該調(diào)至堿性；滅菌法方法是高壓蒸汽滅菌法，所以應(yīng)該等到培養(yǎng)基冷卻后加入血液，否則會(huì)破壞血細(xì)胞；由于該培養(yǎng)基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養(yǎng)基．
（5）根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說(shuō)明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個(gè)實(shí)驗(yàn)要這是對(duì)照實(shí)驗(yàn)，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶．
答案：（1）原核     有氧     
（2）碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽    增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量
（3）平板劃線法      灼燒    
（4）微堿性   冷卻     鑒別
（5）周圍存在透明圈    設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對(duì)照組

點(diǎn)評(píng)：設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)的重點(diǎn)是單一變量原則，在本題中單一變量的原則的設(shè)計(jì)是在培養(yǎng)基中是否加入鮮牛奶．