Question

11．利用微生物分解淀粉生產糖漿具廣闊的應用前景．某同學為了從長期種植馬鈴薯的土壤中分離出能夠高效分解淀粉的細菌，進行了如下實驗．
（1）實驗步驟：
①配制以淀粉為碳源的固體培養(yǎng)基，為了使培養(yǎng)基凝固成固體，應該向培養(yǎng)基中加入的物質是瓊脂．
②將土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落．
③將接種針用灼燒法滅菌后，從②中的培養(yǎng)基上挑取一定量細菌，接種入液體（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基，在恒溫搖床上培養(yǎng)24h，使細菌大量繁殖．
④配制與①相同的培養(yǎng)基，并加入少量碘液，使培養(yǎng)基呈藍紫色．用稀釋涂布平板（涂布分離）法將上一步大量繁殖后的細菌接種到已滅菌的培養(yǎng)基上．
⑤培養(yǎng)一段時間后，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大�。�周圍出現(xiàn)淺色范圍大（較大透明圈）現(xiàn)象的菌落即為初選菌落，經進一步分離、純化后即可達到實驗目的．
（2）上述所有倒平板和接種操作，都應在超凈臺上酒精燈火焰附近進行．
（3）上述實驗步驟中，從用途看，①所用培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．

Answer 1

分析 固體培養(yǎng)基用于分離菌種，液體培養(yǎng)基用于微生物的大量繁殖．鑒別培養(yǎng)基是指一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物或反應物發(fā)生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基． 選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．

解答 解：（1）實驗步驟：①篩選分離出能夠高效分解淀粉的細菌需要使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，瓊脂常常作為凝固劑制作固體培養(yǎng)基．
②將稀釋后的土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上出現(xiàn)許多菌落．
③金屬的接種工具使用灼燒滅菌法滅菌．淀粉分解菌屬于異養(yǎng)需氧型微生物，需要將其接種到液體培養(yǎng)基進行搖床震蕩培養(yǎng)．
④淀粉分解菌的鑒定需要將其用稀釋涂布平板法接種到已滅菌的培養(yǎng)基上．
⑤淀粉遇到碘液會變藍色，在固體平板培養(yǎng)基上，淀粉分解菌能夠將淀粉分解而使得以淀粉分解菌菌落為中心的非藍色的透明圈．出現(xiàn)透明圈的就是淀粉分解菌，經進一步純化培養(yǎng)可達到實驗目的．
（2）微生物培養(yǎng)的成功的關鍵是無菌操作，所以所有倒平板和接種操作，都應在超凈臺上酒精燈火焰附近進行．
（3）從用途分析，①所用培養(yǎng)基以淀粉為碳源的固體培養(yǎng)基，能夠選擇出能夠分解淀粉的菌種，因此屬于選擇培養(yǎng)基．
故答案為：
（1）①淀粉    瓊脂     
②菌落    
③灼燒    液體
④稀釋涂布平板（涂布分離）    
⑤淺色范圍大（較大透明圈）
（2）酒精燈火焰    
（3）選擇

點評 本題主要考查微生物的篩選與分離，意在強化學生對微生物的篩選和分離過程的理解和運用，提高相關的實驗技能．