Question

化學(xué)降解法是一種傳統(tǒng)的測定DNA分子堿基序列的方法，具體操作過程如圖：

（1）由待測序的DNA片段獲得DNA單鏈的方法是

 

，圖中特定化學(xué)試劑的作用是破壞DNA單鏈在某種特定堿基處的

 

鍵．
（2）電泳時，電泳槽內(nèi)先要加入

 

，再將處理好的不同長度的DNA片段樣品加入點樣孔，利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì)，以及分子

 

、形狀的不同，使它們在電場作用下產(chǎn)生不同的

 

，從而實現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定．
（3）從理論上分析，要想測出圖中該DNA片段的全部堿基序列，按以上模式操作至少

 

次．
（4）若想進一步判定該DNA片段中是否含有某基因，可用基因探針檢測．探針的制備是取某基因的

 

條鏈，并作

 

．

Answer 1

考點：用DNA片段進行PCR擴增

專題：

分析：分析題圖：圖示是測定DNA片段中胞嘧啶位置的過程示意圖，①用特制的化學(xué)劑破壞胞嘧啶脫氧核苷酸，產(chǎn)生一組由各種不同長度的DNA鏈組成的混合物；②將上述混合物經(jīng)凝膠電泳處理，將不同長度的DNA鏈按大小分離；③再經(jīng)放射自顯影后，根據(jù)X光底片上所顯現(xiàn)的相應(yīng)譜帶，測定DNA片段中胞嘧啶的位置．

解答： 解：（1）由DNA片段獲得DNA單鏈的方法可用解旋酶或高溫處理待測DNA片段，使其解旋，圖中特定化學(xué)試劑的作用是破壞DNA單鏈的胞嘧啶脫氧核苷酸，在某種特定堿基處的磷酸二酯鍵，使其斷裂，產(chǎn)生一組由各種不同長度的DNA鏈組成的混合物．
（2）電泳時，電泳槽內(nèi)先要加入緩沖液，再將處理好的不同長度的DNA片段樣品加入點樣孔，利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì)，以及分子（本身）大小、形狀的不同，使它們在電場作用下產(chǎn)生不同的 遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定．
（3）因每次只能確定一種堿基的相應(yīng)序列，故從理論上分析，要想測出圖中該DNA片段的全部堿基序列，按以上模式操作至少3次．
（4）基因探針為一段帶有放射性標記的DNA序列．探針的制備是取某基因的一條鏈，并作放射性同位素標記．
故答案為：
（1）用解旋酶（或95℃高溫）處理待測DNA片段     磷酸二酯
（2）緩沖液       （本身）大小     遷移速度
（3）三
（4）一     放射性同位素標記

點評：本題考查DNA分子的結(jié)構(gòu)及根據(jù)圖示進行實驗分析，意在考查 意在考查能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系、能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達形式準確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容及能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題的能力．