Question

丹參酮是從中藥丹參中提取的具有抗腫瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用機制之一是誘導(dǎo)細胞凋亡。以下是相關(guān)的實驗研究過程及結(jié)果：

實驗材料：人肝癌細胞（HepG2），培養(yǎng)液，0.02%二甲亞砜溶液，用0.02%二甲亞砜溶解的0.5 ug/mL、1 ug/mL、1.5 ug/mL的丹參酮溶液，培養(yǎng)瓶等。

①將等量的人肝癌細胞（HepG2）懸液，分別接種于若干含有等量培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中；將培養(yǎng)瓶放于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，靜置、去掉上清液；

②______________，再加入等量的培養(yǎng)液，于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)；

③培養(yǎng)72 h，每24 h用細胞計數(shù)儀檢測癌細胞數(shù)。

（1）請完善上述實驗步驟中相關(guān)內(nèi)容。____________________________________

（2）本實驗的自變量是________________。

（3）設(shè)對照組癌細胞增殖率為100%，用下面公式計算各用藥組癌細胞增殖率：增殖率（%）＝[（用藥組各時段癌細胞數(shù)－用藥組開始癌細胞數(shù)）/（對照組各時段癌細胞數(shù)－對照組開始癌細胞數(shù)）]×100。得到以下數(shù)據(jù)：

表1 丹參酮對HepG2細胞增殖率的影響 （%）

組別	培養(yǎng)時間/h
	24	48	72
對照組	100	100	100
給藥組 ug/mL	0.5	78	62	48
1.0	68	26	21
1.5	48	12	5

①請將表中前48 h的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)給藥組細胞增殖率隨時間變化的柱形圖。

②通過數(shù)據(jù)和柱形圖分析可以得出丹參酮對HepG2細胞的作用效果的特點是：___________。

（4）將培養(yǎng)48 h的培養(yǎng)液離心，去除上清液后經(jīng)過一系列的處理及分析，得到對照組和給藥組48 h細胞周期變化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表達量如表所示：表2 丹參酮對HepG2細胞周期、凋亡率及凋亡蛋白基因Bax和Bcl－2的表達的影響

組別	G1	S	G2＋M	凋亡率	Bax	Bcl-2
對照組	55%	36%	9%	5.6%	28%	53%
實驗組	67%	24%	9%	32.6%	37%	38%

據(jù)此推測，丹參酮使HepG2細胞周期阻滯于________期。丹參酮可能通過促進HepG2內(nèi)________的表達來誘導(dǎo)細胞凋亡從而抑制腫瘤的生長。

（5）順鉑（DDP）是一種DNA損傷藥物，也是目前臨床上多種癌癥化療的首選藥物。若要探究丹參酮聯(lián)合順鉑對HepG2細胞生長的影響，應(yīng)還需設(shè)置_______________________給藥組才能得出結(jié)論。

Answer 1