玉米中賴氨酸的含量較低,原因是賴氨酸合成過程中,天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性受細(xì)胞內(nèi)賴氨酸濃度的影響.為此,有人通過基因修飾或合成,獲得賴氨酸高產(chǎn)的玉米.請回答:
(1)將改造后的基因在體外大量擴(kuò)增,常用的方法是
.在基因改造后,實(shí)施該工程的核心步驟是
,完成此步驟需要用到的2種工具酶是
、
.
(2)將改造后的基因?qū)胗衩讜r(shí),常用
法,它與常見的雙子葉植物的導(dǎo)入方法不同.一般情況下,導(dǎo)入目的基因后,是否可以穩(wěn)定表達(dá)其遺傳特性,還需要進(jìn)行檢測與鑒定,檢測對象是
,有時(shí)還要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定.
(3)進(jìn)行上述基因改造后的玉米體細(xì)胞,再通過
技術(shù)得到高產(chǎn)賴氨酸的玉米植株.
(4)現(xiàn)有一長度為1000堿基對(bp)的DNA分子,用限制酶切開后得到仍是長度為1000bp的DNA分子,說明此DNA分子的形態(tài)為
.
(5)某線性DNA分子分別用限制酶 HindⅢ和 Sma I 處理,然后用這兩種酶同時(shí)處理,得到如下片段(kb為千個(gè)堿基對):
限制酶 | 片段及長度 |
HindⅢ | 2.5kb,5.0kb |
Sma I | 2.0kb,5.5kb |
HindⅢ和Sma I | 2.5kb,3.0kb,2.0kb |
可以推知限制酶HindⅢ和Sma I在此DNA分子中分別有
、
個(gè)識別序列.兩酶同時(shí)處理后得到的片段,再用限制酶EcoR I處理,結(jié)果導(dǎo)致凝膠上3.0kb的片段消失,產(chǎn)生一種1.5kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I將該線性DNA分子進(jìn)行切割,則可得到長度分別為
的片段.