Question

干擾素具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性．將人干擾素基因?qū)�人家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥．
（1）干擾素的產(chǎn)生受細(xì)胞內(nèi)基因的控制，通常處于抑制狀態(tài)．在病毒刺激下，干擾素基因經(jīng)

 

、翻譯形成干擾素前體，進(jìn)一步加工后形成成熟的干擾素，通過

 

方式分泌到細(xì)胞外．
（2）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用

 

 酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
（3）為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的

 

和

 

之間．
（4）某些干擾素可抑制腫瘤細(xì)胞DNA的合成，通過減慢細(xì)胞

 

分裂過程抑制腫瘤．還有些干擾素可提高吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給

 

細(xì)胞的能力，從而在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用．
（5）利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反應(yīng)器中，這樣可以

 

，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

解答： 解：（1）基因控制蛋白質(zhì)合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)重要過程；干擾素是一類糖蛋白，屬于分泌蛋白，在核糖體上合成，經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工，最后由細(xì)胞膜以胞吐的方式將其分泌到細(xì)胞外．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需用用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理動(dòng)物組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
（3）基因表達(dá)載體由啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、目的基因和終止子組成，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別與結(jié)合的部位，終止子是轉(zhuǎn)錄終止子的部位，因此為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．
（4）腫瘤細(xì)胞最大的特點(diǎn)是能無限增殖，其增殖方式是有絲分裂，干擾素能抑制DNA的復(fù)制來抑制腫瘤，同時(shí)提高了吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T淋巴細(xì)胞的能力，從而在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用．
（5）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，由于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制，因此通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反應(yīng)器中，這樣可以擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換．
故答案為：
（1）轉(zhuǎn)錄    胞吐
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）
（3）啟動(dòng)子    終止子
（4）有絲     T淋巴
（5）擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和免疫的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需用注意的細(xì)節(jié)問題，了解基因工程技術(shù)的應(yīng)用；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程；識(shí)記體液免疫和細(xì)胞免疫的具體過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．