Question

【題目】為探究“某品牌酸奶中乳酸菌數量及其對抗生素耐藥性情況”，某同學進行了如下實驗：請分析回答下列問題：

⑴配制的乳酸菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應加入適量的______和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進行的操作是_____________。

⑵接種微生物的方法有很多，圖1中過程③所示的方法為________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，原因是_________________ 。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數后，所得數據需要乘以10n后，才可表示酸奶樣品中的乳酸菌的數量(單位：個/ml)，這里的n=_______。

⑶請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素耐藥性”的實驗操作步驟：

步驟1:分別取______________加入三組無菌培養(yǎng)皿中，再加入滅菌并冷卻到________℃左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2:向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。

步驟3:將接種后的三組培養(yǎng)基和一個________都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)一定時間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】（1）維生素 調pH

（2）稀釋涂布平板法 分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠 6

（3）等量的且適量的青霉素、四環(huán)素、無菌水 50（1分） 未接種的培養(yǎng)基

【解析】（1）配制的乳酸菌的培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應加人適量的維生素和瓊脂。培養(yǎng)基的制作過程是：計算-稱量-溶化-滅菌-倒平板。在溶化和滅菌之間要進行調pH的操作。

（2）圖1過程①②是梯度稀釋，過程③是涂布平板，故過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，原因是分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠。由圖可知，該樣品是10mL，然后經過①過程稀釋了100倍，又經過三次②過程繼續(xù)稀釋了三次10倍，總共被稀釋了100000倍，故最后計算該樣本菌落數后，需要×100000倍×10mL=106，所以 n=6。

（3）由“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素耐藥性”這一實驗目的可知，該實驗的自變量是青霉素、四環(huán)素，所以在無菌培養(yǎng)皿中分別加入等量且適宜的青霉素、四環(huán)素和無菌水，其中無菌水這一組是對照組。倒平板的溫度是50°C左右。因需要檢驗培養(yǎng)基滅菌是否徹底，所以需要將一個未接種的培養(yǎng)基和上述的三組培養(yǎng)基同時置于適宜溫度下培養(yǎng)。