【題目】(2016屆福建福州一中高三下模擬考試(5月質(zhì)檢)生物卷)基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。結(jié)合圖示回答問題。

注:neor是新霉素抗性基因;tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì),導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

(1)將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA 片段都重組到 上,構(gòu)建打靶載體(基因表達載體)。

(2)打靶載體測序驗證正確后,利用 酶,將之線性化,以提高重組率。通過 技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。

(3)為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞,可在培養(yǎng)液中加入 。最后還需要通過 技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞(去除靶基因),將這樣的細(xì)胞通過 培養(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中,暫時不用的細(xì)胞進行液氮(或冷凍)保存。

(4)將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、 的母鼠體內(nèi),一段時間后對受體母鼠進行 檢查,確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內(nèi)同時存在被修飾過的基因和未被修飾的基因。如果某些小鼠的 (選填體細(xì)胞生殖細(xì)胞)恰巧被修飾過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被修飾過的小鼠。

【答案】(1)載體(或質(zhì)粒)(1分)

(2)限制 (2分) 顯微注射(2分)

(3)新霉素和丙氧鳥苷(2分) DNA分子雜交(2分 動物細(xì)胞(或克。2分

(4)生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情)(2分) 妊娠(1分) 生殖細(xì)胞(1分)

【解析】(1)構(gòu)建打靶載體(基因表達載體),需要將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA 片段都重組到載體(或質(zhì)粒)上。

(2)將環(huán)狀的打靶載體線性化,需利用限制酶進行切割,通過顯微注射技術(shù)將其導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞。

(3)在同源重組時,tk基因?qū)⒈磺谐鴣G失,新霉素抗性基因得以保留且結(jié)構(gòu)完整,所以為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞,可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。鑒定去除靶基因的同源重組的細(xì)胞,可通過DNA分子雜交技術(shù)。將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細(xì)胞。

(4)胚胎移植時,需將含有打靶成功細(xì)胞的囊胚移植到同種、生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情)的母鼠體內(nèi),一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查,確保其生下嵌合小鼠。生殖細(xì)胞參與新個體的形成過程,如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被修飾過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被修飾過的小鼠。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

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【題目】植物個體發(fā)育過程中,促進細(xì)胞數(shù)目增加和促進細(xì)胞體積增加各是下列哪些激素的作用

①乙烯

②赤霉素

③脫落酸

④細(xì)胞分裂素

生長素

A. ①,②⑤ B. ①,③④ C. ④,②⑤ D. ①,①⑤

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【題目】下列有關(guān)DNA分子的敘述,正確的是

A. DNA分子的骨架由脫氧核糖與堿基交替連接構(gòu)成

B. DNA分子通過復(fù)制將遺傳信息由親代傳給子代

C. DNA復(fù)制的準(zhǔn)確進行與其雙螺旋結(jié)構(gòu)無關(guān)

D. DNA分子中堿基排列順序的千變?nèi)f化構(gòu)成了DNA分子的特異性

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】分析下圖,回答有關(guān)問題:

1若圖中A為糖類,則A是_________,C是_________。

2B有_________種

3F的基本組成單位是_____________。

4E與F的關(guān)系是_______________。

5F的主要載體是_______________,其中還存在_________

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖所示轉(zhuǎn)錄、翻譯過程中,所涉及的堿基種類和核苷酸種類分別有(   )

DNA  …C—T—C—A…

 

mRNA …G—A—G—U…

 

tRNA  …C—U—C—A

A. 5種、2 B. 6種、2

C. 5種、7 D. 5種、5

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【題目】甲酵母菌進行有氧呼吸,乙酵母菌進行無氧呼吸,若它們消耗了等量的葡萄糖,則它們放出的二氧化碳和吸入的氧氣的體積之比是

A. 1:2 B. 1:1 C. 2:3 D. 4:3

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【題目】下列關(guān)于興奮傳導(dǎo)的敘述,正確的是

A神經(jīng)纖維膜內(nèi)局部電流的流動方向與興奮傳導(dǎo)方向一致

B神經(jīng)纖維上已興奮的部位將恢復(fù)為靜息狀態(tài)的零電位

C突觸小體完成化學(xué)信號電信號的轉(zhuǎn)變

D神經(jīng)遞質(zhì)作用于突觸前膜,使突觸前膜產(chǎn)生興奮或抑制

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】已知20種氨基酸的平均相對分子質(zhì)量是128,現(xiàn)有一蛋白質(zhì)由兩條肽鏈構(gòu)成,共有48個肽鍵,則此蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量最接近于( )

A. 6144 B. 6400 C. 5536 D. 5572

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【題目】光合作用包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個階段,參與暗反應(yīng)必需的物質(zhì)是

A. H2O、CO2、ADP

B. CO2[H]、ATP

C. H2O、CO2ATP

D. [H]、H2O、ADP

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