Question

15．已知某細菌的兩種突變類型細菌Ⅰ和細菌Ⅱ的營養(yǎng)條件和菌落特征都相同，但細菌Ⅰ能分解有機物A而不能分解有機物B，細菌Ⅱ能分解有機物B而不能分解有機物A．現有這兩種類型細菌的混合液樣品，要將其分離，有人設計了一種方案，部分操作步驟如圖．
（1）步驟一使用的是牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中含有細菌生長所需的水、碳源、氮源、無機物、生長因子等營養(yǎng)物質（至少寫出3種）；該培養(yǎng)基是[A、C]（多選）．
A．固體培養(yǎng)基    B．液體培養(yǎng)基    C．通用培養(yǎng)基    D．選擇培養(yǎng)基
（2）步驟一采用平板劃線接種，此接種法可使接種細菌逐漸稀釋，經適宜條件培養(yǎng)，可能形成單個、獨立的菌落，最終可能得到純種的細菌；步驟二各瓶中的培養(yǎng)基加入了A、B兩種有機物的目的是篩選、分離兩種類型的細菌．
（3）無論是培養(yǎng)基（液），接種前除了要調節(jié)pH外，都必須對培養(yǎng)基進行滅菌；接種時必須在超凈工作臺及酒精燈火焰附近操作，原因是防止雜菌污染．
（4）步驟三中，若對其中某瓶培養(yǎng)液中A、B兩種有機物含量進行測定，預測可能的結果并推測結論：
①A與B兩種化合物含量都明顯下降，說明瓶中同時存在細菌Ⅰ和細菌Ⅱ，兩者未分離．
②A含量明顯下降，而B含量幾乎未變，則得到細菌Ⅰ．
③B含量明顯下降，而A含量幾乎未變，則得到細菌Ⅱ．
（5）經步驟三后，若所有瓶中培養(yǎng)液的A、B化合物含量測定結果都如55題中①的情況，則應重復步驟一和步驟二，再測定各瓶中A、B兩種化合物的含量，直到分別獲得每種類型細菌為止．

Answer 1

分析 解答本題需掌握：
1．培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)構成
（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質．

（3）營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．
2．無菌技術
（1）關鍵：防止外來雜菌的入侵．
（2）具體操作
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒．
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌．
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行．
④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸．
3、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．
4、接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．

解答 解：（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中含有細菌生長所需的水、碳源、氮源、無機物、生長因子等營養(yǎng)物質；該培養(yǎng)基一般加瓊脂制成固體培養(yǎng)基，并屬于通用培養(yǎng)基．
（2）由圖可知，步驟一采用平板劃線法接種，此接種法可使接種細菌逐漸稀釋，經適宜條件培養(yǎng)，可能形成單個、獨立的菌落，最終可能得到純種的細菌；步驟二各瓶中的培養(yǎng)基加入了A、B兩種有機物的目的是篩選、分離兩種類型的細菌．
（3）無論是培養(yǎng)基（液），接種前除了要調節(jié)pH外，都必須對培養(yǎng)基進行滅菌；接種時必須在超凈工作臺及酒精燈火焰附近操作，原因是防止雜菌污染．
（4）若對其中某瓶培養(yǎng)液中A、B兩種有機物含量進行測定，若A與B兩種化合物含量都明顯下降，說明瓶中同時存在細菌Ⅰ和細菌Ⅱ，說明兩者未分離；若A含量明顯下降，而B含量幾乎未變，則得到細菌Ⅰ；若B含量明顯下降，而A含量幾乎未變，則得到細菌Ⅱ．
（5）經步驟三后，若所有瓶中培養(yǎng)液的A、B化合物含量都下降，說明兩種細菌還未分開，則需要重復步驟1和步驟2再測定各瓶中A、B兩種化合物的含量，直到分別獲得每種類型細菌為止．
故答案為：
（1）碳源、氮源、無機物、生長因子（任意三種，僅寫出一種或二種不得分）    A、C
（2）平板劃線     菌落     篩選、分離兩種類型的細菌
（3）滅菌    防止雜菌污染
（4）②A含量明顯下降，而B含量幾乎未變，則得到細菌Ⅰ
③B含量明顯下降，而A含量幾乎未變，則得到細菌Ⅱ
（5）重復步驟一和步驟二

點評 本題主要考查微生物的實驗室培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生對相關知識的理解，把握知識間內在聯系的能力．