Question

9．胚胎工程和基因工程目前在生物技術中發(fā)展較快，回答下列問題：
（1）在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過[電脈沖（或電刺激）]（物理方法）將受體細胞激活，使其進行細胞分裂并發(fā)育，當胚胎發(fā)育到[桑椹胚或囊胚]階段時，將胚胎植入另一雌性（代孕）動物體內(nèi)．
（2）在“試管牛”的培育過程中，要使精子和卵母細胞在體外成功結合，需要對精子進行[獲能]處理．另外，培養(yǎng)的卵母細胞需要發(fā)育至[減數(shù)第二次分裂中期]，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細胞和第一極體．
（3）利用體細胞進行核移植技術的難度明顯高于利用胚胎細胞進行核移植的原因是[體細胞分化程度高，不易恢復全能性]．
（4）若要使獲得的轉基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構建的基因表達載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、[人干擾素基因（或目的基因）]、終止子、標記基因和復制原點等．目前常用的措施是將該基因表達載體導入牛的[受精卵]（填“受精卵”或“乳腺細胞”），導入方法是[顯微注射法]．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、動物細胞核移植：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為克隆動物．

解答 解：（1）在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過電脈沖（或電刺激）將受體細胞激活，使其進行細胞分裂并發(fā)育；胚胎移植時，需要將胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段．
（2）在“試管�！钡呐嘤�過程中，要使精子和卵母細胞在體外成功結合，需要對精子進行獲能處理．另外，培養(yǎng)的卵母細胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂中期．
（3）利用體細胞進行核移植技術的難度明顯高于利用胚胎細胞進行核移植的原因是體細胞分化程度高，不易恢復全能性．
（4）目的基因轉入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；培育轉基因動物時，通常選用受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高．若要使獲得的轉基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構建的基因表達載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、人干擾素基因（或目的基因）終止子、標記基因和復制原點等．
故答案為：
（1）電脈沖（或電刺激）  桑椹胚或囊胚
（2）獲能  減數(shù)第二次分裂中期
（3）體細胞分化程度高，不易恢復全能性
（4）人干擾素基因（或目的基因）  受精卵  顯微注射法

點評 本題考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題；識記核移植的具體過程；識記胚胎移植的具體過程，了解轉基因生物的安全性問題，能結合所學的知識答題．