Question

【題目】如圖為利用人成纖維細胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細胞（具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活）進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關(guān)問題。

（1）圖示方法應(yīng)用的技術(shù)有 和 。

（2）操作所用的成纖維細胞應(yīng)傳代 代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是 。

（3）HAT培養(yǎng)基起 作用，培養(yǎng)時溫度應(yīng)為36.5±0.5℃，操作中加入烏本苷的目的是 。

（4）如表所示為雜交細胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶（“＋”表示存在，“一”表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表判斷，編碼 酶和 酶的基因位于染色體2上，呈線性排列。

		雜交細胞
		A	B	C
人類染色體	1	－	＋	＋
	2	＋	－	＋
	3	＋	＋	－
酶	m	＋	－	＋
	n	－	＋	＋
	p	＋	－	＋
	q	－	＋	＋

Answer 1

【答案】（1）動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng) （2）10 PEG或滅活的病毒 （3）選擇 除去成纖維細胞 （4） m p

【解析】（1）分析過程圖可知，圖中利用促融劑誘導(dǎo)兩細胞融合的技術(shù)屬于動物細胞融合技術(shù)；經(jīng)篩選后的雜交細胞培養(yǎng)利用的是動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。

（2）操作所用的成纖維細胞應(yīng)傳代10代以內(nèi)，以保證其維持正常的二倍體核型；誘導(dǎo)動物細胞融合時需要加入的促融劑是PEG或滅活的病毒。

（3）過程圖中，融合后的細胞類型有AA、BB和AB型，用HAT培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)時，小鼠骨髓瘤細胞自身融合的BB型細胞不能存活，但人成纖維細胞自身融合的AA型細胞及人成纖維細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合的AB型細胞均能存活；然后換用含烏本苷的培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)時，人成纖維細胞自身融合的AA型細胞及人成纖維細胞均不能存活，故經(jīng)兩次篩選可得到人成纖維細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合的AB型細胞。

（4）分析表中記錄可見，C細胞內(nèi)不含3號染色體但卻含有控制4種酶合成的基因，說明控制4種酶合成的基因均不在3號染色體上；A細胞不含1號染色體但卻含有m和p兩種基因，說明m和p兩種基因均不在1號染色體上；結(jié)合C細胞核A細胞的結(jié)果可知m和p兩種基因不在3號和1號染色體上，故可能在2號染色體上；B細胞不含2號染色體但同時含有m和p兩種基因，進一步證明了m和p兩種基因，均位于2號染色體上，故兩者在2號染色體上呈線性排列。