Question

2008年我國(guó)某地由于柑橘大實(shí)蠅的危害，使橘農(nóng)遭受到了很大的損失，當(dāng)?shù)卣�府想盡一切辦法幫助橘農(nóng)盡量減少損失．
（1）有人想提取橘皮精油獲取利潤(rùn)，一般提取橘皮精油的方法是

 

法，之所以不采取水蒸氣蒸餾法，是因?yàn)樗�中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料

 

和有效成分

 

等問(wèn)題．
（2）某橘農(nóng)發(fā)現(xiàn)自家有一株橘樹具有抗蟲性狀，欲利用組織培養(yǎng)技術(shù)大量繁殖，該技術(shù)應(yīng)先將離體的柑橘組織或細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間，使其通過(guò)

 

分裂方式形成愈傷組織，此過(guò)程稱之為

 

，然后繼續(xù)培養(yǎng)，又可以重新長(zhǎng)成根或芽等器官，這一過(guò)程稱之為

 

．
（3）組織培養(yǎng)的選材非常關(guān)鍵，植物材料的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗．若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)，則應(yīng)選擇花粉發(fā)育至

 

期的花藥培養(yǎng)成功率最高．選擇花粉時(shí)，一般要通過(guò)

 

來(lái)確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時(shí)需要對(duì)花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色，常用的染色劑是

 

．產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑；一種是花粉通過(guò)

 

階段發(fā)育為植株；另一種是花粉在

 

培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再分化成植株．這兩種途徑之間并沒有絕對(duì)的界限，主要取決于培養(yǎng)基中

 

．
（4）影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關(guān)鍵的激素有

 

和

 

．
（5）無(wú)菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，請(qǐng)說(shuō)明下列各項(xiàng)需要消毒，還是需要滅菌．
①培養(yǎng)基，②培養(yǎng)皿，③接種環(huán)，④花蕾，⑤實(shí)驗(yàn)操作者的雙手，⑥三角錐形瓶．

 

（填編號(hào)）需要滅菌，

 

（填編號(hào)）需要消毒．

Answer 1

考點(diǎn)：從生物材料中提取某些特定成分,植物的組織培養(yǎng)

專題：

分析：本題主要考查植物組織培養(yǎng)的知識(shí)．
植物組織培養(yǎng)是指利用特定的培養(yǎng)將離體的植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)成完整植株的過(guò)程，所以花藥的離體培養(yǎng)、基因工程中的受體細(xì)胞的培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交后雜種細(xì)胞的培養(yǎng)以及植物的大量快速繁殖都要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．植物組織培養(yǎng)的過(guò)程是外植體

脫分化

愈傷組織

再分化

根、芽→試管苗．脫毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或莖，主要是這些部位不帶病毒．植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用時(shí)，兩者用量的比例影響著細(xì)胞的發(fā)育方向（或分化）．培養(yǎng)中必須具備植物激素、無(wú)機(jī)物（礦質(zhì)元素）、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)．愈傷組織的特點(diǎn)是細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則、呈無(wú)定形狀態(tài)．

解答： 解：（1）由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題，故一般采用壓榨法．若采用水蒸氣蒸餾法，會(huì)出現(xiàn)原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題．
（2）將離體的柑橘組織或細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間，使其通過(guò)有絲分裂分裂方式形成愈傷組織，此過(guò)程稱之為脫分化，然后繼續(xù)培養(yǎng)，又可以重新長(zhǎng)成根或芽等器官，這一過(guò)程稱之為再分化．
（3）單核期花粉對(duì)離體刺激敏感，選用該期花粉可提高培養(yǎng)的成功率，選擇花粉時(shí)可用顯微鏡觀察、篩選；對(duì)花粉細(xì)胞核染色應(yīng)該選擇堿性染料，常用醋酸洋紅．產(chǎn)生花粉植株一般有兩種途徑；一種是花粉通過(guò)胚狀體階段發(fā)育為植株；另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再分化成植株．細(xì)胞培養(yǎng)成植株的兩條途徑取決于植物激素的種類及比例，尤其是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素．
（4）植物組織培養(yǎng)時(shí)最關(guān)鍵的激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素．
（5）滅菌對(duì)象為培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)器材，消毒對(duì)象為要保持活性的材料和實(shí)驗(yàn)者自身．
故答案為：
（1）壓榨    焦糊   水解
（2）有絲分裂  脫分化  再分化
（3）單核  鏡檢（顯微鏡觀察）  醋酸洋紅   胚狀體   誘導(dǎo) 激素的種類及其濃度配比
（3）在柑橘個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，不同的細(xì)胞中遺傳信息執(zhí)行情況不同，細(xì)胞分化形成不同的組織和器官
（4）生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素
（5）①②③⑥④⑤

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查學(xué)生對(duì)植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)的記憶和理解能力．在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料．植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化．消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌．