Question

科學家從某些能無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)許多動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請回答以下相關(guān)問題：

（1）利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是

 

．
（2）利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時有兩次篩選，第1次篩選的目的是

 

，第2次篩選的目的是

 

．
（3）有人提出，可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如右圖所示．

請回答：
①酶A是指

 

，酶B是指

 

②對已導入重組質(zhì)粒的II進行“檢測”的目的是

 

；
（4）也有人提出用細胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程：

 

．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：傳統(tǒng)的單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
基因工程的方法：由于效應B細胞沒有細胞增殖的能力，因此選擇“無限增殖調(diào)控基因（prG）”作為目的基因，“效應B細胞”作為受體細胞，以期望獲得既能無限增殖、又能產(chǎn)生特異性抗體的效應B細胞．
細胞核移植技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體：由于某些能無限增殖的細胞的細胞質(zhì)中含有無限增殖調(diào)控基因（prG），因此在細胞核移植時，選擇效應B細胞的細胞核和骨髓瘤細胞的細胞質(zhì)進行細胞核移植．

解答： 解：（1）利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是滅活的病毒．
（2）利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時有兩次篩選，第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細胞，第2次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞．
（3）在基因工程中，獲取目的基因和質(zhì)粒需要使用限制酶，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒；基因工程中，將目的基因?qū)�入受體細胞后，還需要目的基因的檢測和鑒定，其目的是檢測目的基因是否在受體細胞中成功表達．成功導入含有prG基因的細胞中，由于prG基因具有調(diào)控細胞無限增殖的功能，故Ⅲ中的細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（4）由于調(diào)控細胞無限增殖的prG基因位于細胞質(zhì)中，因此若要采用細胞核移植獲得單克隆抗體時，只能講漿細胞的細胞核移入到含有prG基因的細胞質(zhì)中，獲得重組細胞，最終獲得單克隆抗體．
故答案為：
（1）滅活的病毒
（2）篩選出雜交瘤細胞　     篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞
（3）①限制性核酸內(nèi)切酶　   DNA連接酶
②檢測目的基因在受體細胞中是否進行了表達（或檢測受體細胞是否顯示出目的基因控制的性狀）
（4）見下圖（核質(zhì)分離、重組細胞、篩選、培養(yǎng)）

點評：本題考查基因工程、動物細胞核移植和單克隆抗體的制備過程，比較綜合．答題時要注意題干中的信息，如利用細胞核移植獲得單克隆抗體時，只能將漿細胞的細胞核移植到去核的含有prG基因的細胞質(zhì)中，因為根據(jù)題干可知，prG基因只存在于能無限增殖細胞的細胞質(zhì)中．