【題目】擬南芥種子萌發(fā)時,下胚軸頂端形成彎鉤(頂勾,如圖1),在破土而出時起到保護子葉與頂端分生組織的作用。為研究生長素(IAA)與頂端彎曲的關(guān)系,科研人員進行了相關(guān)實驗。

1)擬南芥種子萌發(fā)時,頂端分生組織產(chǎn)生的IAA運輸至頂勾處,促進細胞的_________生長。由于IAA的作用具有_________性,低濃度促進生長,高濃度抑制生長,頂勾兩側(cè)細胞生長狀況不同,因而彎曲度發(fā)生改變。

2)科研人員發(fā)現(xiàn)一株TMK基因缺失的突變體(tmk突變體),用_________法將含TMK基因的T-DNA轉(zhuǎn)入tmk突變體中,分別測定三種不同擬南芥種子萌發(fā)時,頂勾處的彎曲度,得到圖2所示結(jié)果。實驗結(jié)果顯示_________。

3)科研人員進一步測定了三種植株頂勾彎曲處內(nèi)外側(cè)(如圖3)的細胞長度,結(jié)果如圖4。據(jù)實驗結(jié)果推測,tmk突變體頂勾彎曲度改變的原因是其頂勾彎曲處_________。

4)科研人員推測,不同濃度的IAA可能通過TMK蛋白調(diào)控細胞生長(機理見圖5),在IAA濃度較高時,tmk突變體無法剪切TMK蛋白。

一種從分子水平證實這一推測的思路是:測定并比較_________植株的頂勾彎曲處_________(填內(nèi)側(cè)或外側(cè))細胞的_________量。

【答案】伸長 兩重 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 tmk突變體的頂勾彎曲減小,轉(zhuǎn)入TMK基因可部分恢復頂勾彎曲 內(nèi)側(cè)細胞生長加快 tmk突變體和野生型 內(nèi)側(cè) TMK蛋白C端量、細胞核內(nèi)磷酸化蛋白X和促進生長基因的表達

【解析】

1、生長素類通常是通過促進細胞的伸長來促進植物生長的,在生產(chǎn)上的應用有促進扦插的枝條生根、促進果實發(fā)育、防止落花落果等。

2、赤霉素的生理作用是促進細胞伸長,從而引起莖桿伸長和植物增高,此外它含有防止器官脫落和解除種子、塊莖休眠,促進萌發(fā)等作用。

3、生長素的作用表現(xiàn)為兩重性:既能促進生長,也能抑制生長;既能促進發(fā)芽,也能抑制發(fā)芽;既能防止落花落果,也能疏花疏果。生長素所發(fā)揮的作用,因為濃度、植物細胞的成熟情況和器官的種類不同而有較大的差異。

1)由分析可知,生長素是通過促進細胞伸長來促進生長的,可推測頂端分生組織產(chǎn)生的IAA運輸至頂勾處,促進細胞的伸長生長。在頂勾處,由于重力的影響,近地側(cè)生長素濃度高,遠地側(cè)生長素濃度低,由于IAA的作用具有兩重性,低濃度促進生長,高濃度抑制生長,頂勾兩側(cè)細胞生長狀況不同,因而彎曲度發(fā)生改變。

2)科研人員發(fā)現(xiàn)一株TMK基因缺失的突變體(tmk突變體),基因工程中將目的基因?qū)胫参锛毎ǔS棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法實現(xiàn),故此在這里用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含TMK基因的T-DNA轉(zhuǎn)入tmk突變體中,然后分別測定三種不同擬南芥種子萌發(fā)時,頂勾處的彎曲度,根據(jù)圖2的結(jié)果可知tmk突變體的頂勾彎曲減小,轉(zhuǎn)入TMK基因可部分恢復頂勾彎曲。

3)圖4的實驗結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因前后頂勾處外側(cè)細胞伸長基本沒變化,只是缺失突變體頂勾處內(nèi)側(cè)細胞伸長比轉(zhuǎn)基因后更快,故此得出結(jié)論,tmk突變體頂勾彎曲度改變的原因是其頂勾彎曲處內(nèi)側(cè)細胞生長加快。

4)圖5顯示在IAA濃度較高時,TMK蛋白C端被剪切,然后TMK蛋白C端進入細胞促進了核內(nèi)蛋白X的磷酸化,進而抑制了促進生長因子的表達,導致細胞伸長生長被抑制,而tmk突變體無法剪切TMK蛋白,故此頂勾內(nèi)側(cè)細胞伸長比野生型快,為了驗證這一推測,需要測定并比較tmk突變體和野生型植株的頂勾彎曲處內(nèi)側(cè)細胞的TMK蛋白C端量、細胞核內(nèi)磷酸化蛋白X和促進生長基因的表達量,依次來驗證上述推測。

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2)構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體時,需要選擇水稻胚乳細胞啟動子,而不能選擇其他物種和組織細胞的啟動子,原因可能是_________________。

3)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中,為了吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,需添加_________物質(zhì)。

4)選用大腸桿菌作為受體細胞的優(yōu)點有____________(答出兩點即可)。但相比于水稻胚乳細胞,利用大腸桿菌獲得的rHSA也有一些缺點,請從生物膜系統(tǒng)的角度進行分析_____________________。

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