Question

2．圖為單克隆抗體制備流程示意圖．

（1）單克隆抗體制備技術(shù)的基礎(chǔ)是細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)．
（2）細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基上培養(yǎng)，目的是篩選雜交瘤細(xì)胞．在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機(jī)鹽，但要注意無機(jī)鹽的種類和數(shù)量（濃度），以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液，其目的是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，使得到的抗體純度更高（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）若用¹⁵N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是
核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜．
（5）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)靈敏度高并且可大量制備．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
2、單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽性．

解答 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）．在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機(jī)鹽，但要注意無機(jī)鹽的種類和濃度，關(guān)注培養(yǎng)基的滲透壓和營養(yǎng)充沛，以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液，其目的是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，使得到的抗體純度更高（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）用¹⁵N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，單克隆抗體是分泌蛋白質(zhì)，首先在核糖體中合成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上初步加工，之后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)邊緣以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，轉(zhuǎn)移到高爾基體上，與高爾基體膜融合，囊泡中的物質(zhì)也進(jìn)入到高爾基體中，在高爾基體中進(jìn)一步加工成成熟的蛋白質(zhì)，高爾基體膜也突起形成小泡，小泡離開高爾基體，轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上，小泡中物質(zhì)釋放到細(xì)胞膜外．因此放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜．
（5）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高、可大量制備．
故答案為：
（1）細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)        
（2）篩選雜交瘤細(xì)胞　        種類和數(shù)量（濃度）
（3）將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，使得到的抗體純度更高（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（4）核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜
（5）特異性強(qiáng) 靈敏度高并且可大量制備

點(diǎn)評(píng) 本題考查了單克隆抗體的制備過程以及各細(xì)胞器之間的協(xié)調(diào)配合的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．